ГОСТ Р 56833—2015
Приложение В
(обязательное)
Определение массовой доли лактозы методом высокоэффективной жидкостной
хроматографии
Диапазон измерений массовой доли лактозы в продукте — от 0.05 % до 100.0 %.
В.1 Сущность метода
Метод основан на определении лактозы в фильтрате, полненном после удаления из пробы жира и белка,
методом высокоэффективной жидкостной хроматографии при разделении на анионообменной колонке.
Полученные результаты измерения сравнивают со значениями массовой доли лактозы в стандартном образце,
используя градуировочный график.
/
В.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы
Хроматограф жидкостный высокоэффективный, включающий следующие элементы:
- колонку анионобменную длиной 300 мм. размером внутреннего диаметра 78 мм:
- предколонку длиной 300 мм. размером внутреннего диаметра 46 мм. заполненную катионом в
гидрогенной форме;
- предколонку длиной 300 мм. с размером внутреннего диаметра 46 мм, заполненную анионом в
карбонатной форме:
- детектор высокочувствительный рефрактометрический с порогом шума не более 5 • 10-1 единиц
рефракции:
- мешалку магнитную:
- насос, способный пропускать раствор со скоростью
0.3 — 0.6
cmj mhh
.
с
пульсацией не более
1
% при
давлении на колонкуот 1.5 МПа до 4.0 МПа:
- термостат для хроматографических колонок, обеспечивающий поддержание температуры элюента (85 ±
2) °С;
- устройство петлевое для ввода пробы рабочим объемом петли 0.020 см1;
- программу компьютерную для статистической обработки результатов типа «Мультихром», версия 1.5 и
выше со встроенным интегратором.
Весы неавтоматического действия по ГОСТ OIML R 76-1 или весы по нормативным документам,
действующим на территории государств, принявших стандарт с пределами допускаемой абсолютной
погрешности однократного взвешивания ± 0.001 г. ± 0,2 мг.
Дозаторы пилеточные переменного объема дозирования в диапазоне 0.040 — 1.000 см1с относительной
погрешностью дозирования ± 1%.
Микрошприц для ВЭЖХ вместимостью 0.100 см1.
Часы электронно-механические по ГОСТ 27752.
Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.
Баня ультразвуковая лабораторная рабочим объемом не менее 2 дм1.
Центрифуга лабораторная, обеспечивающая скорость вращения не менее 15000 об/мин.
Колбы мерные 1-50-2. 1-100-2. 1-250-2. 1-1000-2 по ГОСТ 1770.
Цилиндры вместимостью 1-50-2. 1-100-2 по ГОСТ 1770.
Пипетки градуированные 1-1-2-10 по ГОСТ 29227.
Пипетки с одним делением 1(2)-2-5, 1(2)-2-10, 2-2-20 по ГОСТ 29169.
Колбы П-1-50-19/26 ТС (К.-1-25-19/26 ТС) по ГОСТ 25336.
Воронки В-56-80 ХС по ГОСТ 25336.
Насос водоструйный лабораторный по ГОСТ 25336.
Прибор для фильтрования стеклянный с фильтром с размером диаметра 0.45 мкм.
Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026, фильтры с размером диаметра 12.5см.
Фильтры мембранные с размером диаметра пор не более 0.5 мкм.
Фильтр нейлоновый с размером пор 0.45 мкм.
Образец стандартный лактозы, массовой долей основного вещества не менее 99.0 %.
Вода для лабораторного анализа первой степени чистоты (бидистиллированная) по действующей
нормативной документации.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования, не уступающих
вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность
измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.
В.З Отбор проб
Отбор проб — по ГОСТ 26809.1.
В.4 Подготовка к проведению измерений
В.4.1 Подготовка стандартного раствора углевода
В мерную колбу вместимостью 100 см3помещают 1 г стандартного образца лактозы с записью результата
до четвертого знака после запятой и растворяют в небольшом количестве бидистиллированной воды. Объем
17