ГОСТ 33379—2015
8.5.3.7 Способность ферментации маннита и сахарозы
Часть бактериальной колонии, выбранной для идентификации, пересевают в среды Гисса с ман
нитом и сахарозой. Посевы инкубируют при температуре (36 ± 1) ’С в течение 24 ч.
Бактерии рода Salmonella не ферментируют сахарозу, но ферментируют маннит. При сбражива
нии маннита цвет среды изменяется, образуется или не образуется газ.
8.5.3.8 Способность ферментации салицина
Часть бактериальной колонии, выбранной для идентификации, пересевают в среду Гисса с сали
цином. Посевы инкубируют при температуре (36 ± 1) ’С в течение 24 ч.
Бактерии рода Salmonella не ферментируют салицин.
8.5.3.9 Образование ацетоина (реакция Фогес-Проскауэра)
Культуры пересевают в МПБ с глюкозой. Посевы инкубируют при температуре (36 ± 1) °С в тече
ние 48 ч. После инкубирования к 1 см3 культуральной жидкости добавляют 0.6 см3 раствора а-нафтола
и 0.2 см3 раствора гидроокиси калия концентрации 400 г/см3. После прибавления каждого реактива
пробирку встряхивают. Появление ярко-красного окрашивания не позднее чем через 15 мин указывает
на положительную реакцию образования ацетоина.
Бактерии рода Salmonella ацетоин не образуют (реакция Фогес-Проскауэра отрицательная).
8.5.3.10 Определение образования индола
При исследовании на индол из колонии микроорганизмы высевают в пробирки с 1 %-ной пептон-
ной водой или среду на индол с триптофаном и термостатируют при температуре (36 ± 1) °С в течение
24 ч. Затем в пробирку с суточной культурой по стенке добавляют 5— 10 капель реактива Эрлиха. При
наличии индола не позднее чем через 5 мин в пограничном слое образуется ярко-красное кольцо, при
отсутствии — кольцо остается светло-желтого цвета.
Для определения индолообраэоваиия также используют реактив Ковача. Для этого к суточной
культуре вместо реактива Эрлиха добавляют 0.2—0.3 см3 реактива Ковача и взбалтывают. Результат
учитывают через 10 мин — реактив поднимается на поверхность среды и при наличии индола окраши
вается в темно-красный цвет.
Бактерии рода Salmonella индола не образуют.
8.5.3.11 Декарбоксилирование лизина
Культуру высевают на поверхность жидкой лизиновой среды для декарбоксилирования. Посевы
инкубируют в термостате при температуре (36 ± 1) "С в течение 24 ч.
Появление темно-красной или фиолетовой окраски свидетельствует о декарбоксилировании ли
зина (положительная реакция), желтая окраска среды — об отрицательной.
Бактерии рода Salmonella дают положительную реакцию.
8.5.3.12 Определение подвижности
Культуры пересевают уколом в полужидкий мясопептонный агар. Посевы инкубируют в термо
стате при температуре (36 ± 1) X в течение 24 ч. При росте подвижных культур отмечается диффузный
рост по всему столбику агара, при росте неподвижных культур — вдоль места укола.
Большинство штаммов бактерий рода Salmonella подвижны.
8.5.4 Расчот индекса сальмонелл в органичоских удобрениях
При наличии положительного результата прямого посева суспензии на висмут-сульфит агар вы
считывают среднеарифметическое число выросших колоний в 0.1 см3, что соответствует количествен
ному содержанию (индексу) сальмонелл в органическом удобрении.
Прямой посев суспензии может быть заменен растиранием 0.1—0.5 г органического удобрения на
поверхности висмут-сульфит агара. Количество выросших колоний сальмонелл пересчитывают на 1 г
органического удобрения.
8.6 Определение бактерий рода Staphylococcus (стафилококков)
8.6.1 Для идентификации стафилококков из первого разведения по 8.1.1 отбирают 2 см3 суспен
зии и вносят в солевой МПБ с 6.5 %-ным хлоридом натрия в соотношении 1:5 и инкубируют посевы в
термостате в течение 24—48 ч при температуре 37 °С.
8.6.2 Из пробирок, в которых обнаружен рост бактерий, т. е. наблюдалось диффузное помутнение
с последующим выпадением осадка или на поверхности бульона образовалась пленка, делают пере
сев на агар Чепмена в чашках Петри. Посевы инкубируют аналогично 8.4.6.1. Из характерных круглых,
выпуклых и окрашенных (белые, лимонные, оранжевые) колоний с агара Чепмена готовят мазки, окра
шивают их по Граму и микроскопируют.
21