ГОСТ 33379—2015
Если уровень достоверности составляет 99 %, то критерий (0 равен 2,7.
8.1.3.4Для учета микроорганизмов, посеянных в жидкие среды по 8.1.2.4. используют таблицу
Мак-Креди, составленную на основании обработки многочисленных результатов методом вариацион
ной статистики (см. приложение Г).
Для этого необходимо составить числовую характеристику из трех цифр. Первая цифра показы
вает число параллельно засеянных пробирок (отмечают последнее разведение, в котором рост микро
организмов наблюдается во всех параллельных пробирках). Следующие две цифры обозначают
число пробирок, где еще происходит развитие микроорганизмов в двух последовательных разведениях.
По таблице Мак-Креди находят вероятное число бактериальных клеток, соответствующее число
вой характеристике, и умножают на степень разведения, при которой отмечен рост во всех параллель
ных пробирках. При пересчете на 1 г абсолютно сухого органического удобрения полученный результат
умножают на коэффициент, рассчитанный по формуле (2).
Пример
Число параллельных засеянных пробирок равно трем, при этом последнее разведение, в котором
наблюдается рост микроорганизмов во всех трех пробирках, равно 10 . Число пробирок, где еще про
исходит развитие микроорганизмов, в двух последовательных разведениях равно двум и одной соот
ветственно. Таким образом, числовая характеристика составляет 321.
Разведение
1<Н10-4
10-5
10-6
10~7
Число параллельно засеянных пробирок
33
333
Число пробирок, в которых обнаружен рост
33
210
2х — общее число подсчитанных колоний при посеве данного разведения:
п — число повторностей;
ЬГ
<>*= +
п
-------
среднеквадратическое отклонение;
2
—
критерий (0 при Р = 0,95,
R — разведение, из которого проведен посев;
V — объем суспензии, взятый для посева по 8.1.2.2—8.1.2.3, см3.
В соответствии с таблицей Д.1 находим, что вероятное число клеток равно 15, которое умно
жаем на 10’4. Если влажность органического удобрения равна 72 %. то вычисленный по формуле (2)
коэффициент будет равен 3,57.
Число клеток в 1 г абсолютно сухого органического удобрения равно: 161(Г4-3,57 = 535500.
8.2 Определение общего микробного числа (ОМЧ) и спорообразующих микроорганизмов
8.2.1Из каждой анализируемой пробы органических удобрений в зависимости от степени предпо
лагаемого загрязнения используют для посева не менее двух различных разведений с таким расчетом,
чтобы на чашках выросло от 30 до 300 колоний.
Суспензию анализируемой пробы органического удобрения в каждом разведении тщательно пе
ремешивают и вносят по 1 см3в две стерильные чашки Петри для каждого разведения, слегка приот
крывая крышки. После внесения суспензии в каждую чашку Петри вливают 15—20 см3 (на чашку диа
метром 90—100 мм) расплавленного и остуженного до температуры 45 °С — 49 °С питательного агара
после фламбирования края посуды, в которой он содержится. Затем быстро смешивают содержимое
чашек Петри, равномерно распределяя по всему дну. избегая образования пузырьков воздуха, попада
ния агара на края и крышку чашки Петри. Данную процедуру производят на горизонтальной поверхно
сти. где чашки оставляют до застывания агара.
После застывания питательного агара чашки Петри с посевами помещают в термостат вверх дном
и инкубируют при температуре (37 ± 1) °С в течение (24 ± 2) ч.
Подсчитывают все выросшие на чашке колонии, наблюдаемые под микроскопом при увеличении в
два раза. Учитываюттолько те чашки Петри, на которых выросло не более 300 изолированных колоний.
Если на одной из двух чашек Петри подсчет невозможен, результат определяют на основании
учета колоний на одной чашке Петри.
16