ГОСТ 33379—2015
6.3.2.3 Приготовление водного агара
Втермостойкую плоскодонную либо коническую колбу по ГОСТ 25336 помещают 1000 см3дистил
лированной воды и вносят 20 г микробиологического агара. Среду стерилизуют в автоклаве в течение 30
мин при температуре 121 °С, давлении 101.3 кПа.
Срок хранения водного агара при температуре от 4 °С от 25 °С — не более 3 мес.
6.3.2.4 Приготовление пептонной воды
В термостойкую плоскодонную либо коническую колбу по ГОСТ 25336 помещают 1000 см3 дис
тиллированной воды, вносят 10 г пептона и 5 г хлористого натрия, кипятят в течение 15 мин. В горячую
жидкость вносят 1.0 г однозамещениого фосфорнокислого калия. 1.0 г двузамещенного фосфорно
кислого калия. 0,5 г сернокислого 7-водного магния и 0,5 г хлористого натрия. Доводят pH до 7.5—7.7.
Стерилизуют в автоклаве в течение 25 мин при температуре 121 °С и давлении 101.3 кПа.
Срок хранения пептонной воды при температуре от 4 °С от 25 °С — не более 2 мес.
6.3.2.5 Приготовление 0.1 %-ного раствора пептона
К 1000 см3 дистиллированной воды добавляют 1 г пептона, перемешивают и кипятят в течение
5 мин. Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр, разливают в пробирки, колбы или фла
коны и стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С в течение 20 мин.
Срок хранения 0.1 %-ного раствора пептона при температуре от 4 еС от 25 °С в условиях, исклю
чающих испарение влаги и нарушение асептики. — не более 2 мес.
6.3.2.6 Приготовление мясопептониого бульона (агара) с глюкозой
К 1000 см3 мясопептониого бульона по ГОСТ 20730 перед стерилизацией добавляют 1 или 10 г
глюкозы, устанавливают pH 7,0—7,2 и стерилизуют в течение 20 мин при температуре 121 8С.
Срок хранения мясопептониого бульона (агара) с глюкозой при температуре от 4 аС от 25 °С — не
более 2 мес.
6.3.2.7 Приготовление среды Кесслер-Сеенертона
К 1000 см3 дистиллированной воды добавляют 10 г пептона и 50 см3 желчи. Смесь кипятят в
течение 30 мин. фильтруют через бумажный фильтр, добавляют 2.5 г лактозы, доводят объем дистил
лированной водой до 1000 см3, устанавливают pH 7.8— 8.2, затем добавляют 4 см3 1 %-ного водного
раствора генцианвиолета. разливают в пробирки вместимостью 10 см3 или во флаконы вместимостью 50
см3, стерилизуют в автоклаве при температуре 121 °С и давлении 50.66 кПа в течение 15 мин.
Срок хранения среды Кесслор-Свенертона при температуре от 2 °С до 8 8С — не более 2 мес.
6.3.2.8 Приготовление лактозного бульона с ТТХ
К 100 см3мясопептониого бульона добавляют 0.5 г лактозы и после тщательного перемешивания
устанавливают pH 6,2—6,4. Среду разливают в пробирки вместимостью 9 см3и стерилизуют в автокла ве
при температуре 121 °С идавлении 50,66 кПа в течение 20 мин. Перед посевом в каждую пробирку с
лактозным бульоном прибавляют 0,3 см32 %-ного раствора ТТХ, для приготовления которого к 100 см3
стерильной дистиллированной воды прибавляют 2 г ТТХ.
Срок хранения лактозного бульона с ТТХ в темном месте — не более 2 мес.
6.3.2.9 Приготовление селенитового бульона по Лейфсону
К 1000 см3дистиллированной водыдобавляют 5 г пептона. 7 гдвузамещенного фосфорнокислого
безводного натрия. 3 г однозамещениого фосфорнокислого натрия и 4 г лактозы.
Срок хранения селенитового бульона по Лейфсону при температуре от 2 °С до 8 °С — не более
2 мес.
6.3.2.10 Приготовление полужидкой среды с глюкозой
К 1000 см3дистиллированной воды добавляют 3,0 г микробиологического агара, 10 г пептона, 5 г
глюкозы, устанавливают pH 7.4—7,6. разливают в пробирки с поплавками или комочками ваты и стери
лизуют в автоклаве при температуре 121 °С идавлении 50,66 кПа в течение 12 мин.
Срок хранения полужидкой среды с глюкозой — не более 2 мес.
6.3.2.11 Приготовление магниевой среды
Для приготовления магниевой среды используют два раствора.
Для приготовления первого раствора берут 4,2 г пептона. 7,0 г хлористого натрия, 1.5 г одноза-
мещенного фосфорнокислого калия, 10.0 г дрожжевого экстракта и растворяют в 890 см3дистиллиро
ванной воды.
Для приготовления второго раствора берут 36.0 г хлористого магния и растворяют в 90 см3 дис
тиллированной воды.
Для приготовления магниевой среды смешивают первый и второй растворы и добавляют 50 см3
0,1 %-ного водного раствора бриллиантовой зелени. Полученную среду стерилизуют в автоклаве при
температуре 121 °С и давлении 50,66 кПа в течение 20 мин.
Ю