ГОСТ 33379—2015
Засеянные пробирки инкубируют в течение трех-десяти суток в зависимости от скорости роста
микроорганизмов, численность которых определяют. При этом отмечают плюсом «+» пробирки с раз
ведениями. в которых развились представители определяемой группы микроорганизмов, а минусом «-
» — при их отсутствии. В жидких средах о развитии микроорганизмов разных групп судят по помутне нию
среды, образованию осадка, пленки, пузырьков газа, изменению окраски и т. д.
8.1.3 Учет микроорганизмов
8.1.3.1 После прохождения необходимого срока инкубации чашки Петри вынимают из термостата
и подсчитывают число выросших колоний. Для правильного определения числа клеток их подсчиты
вают только в таких чашках Петри, в которых выросло не менее десяти и не более 250—300 колоний.
Закрытые чашки Петри просматривают в проходящем свете и отмечают колонии тушью или маркером
по стеклу. Для удобства дно чашки с помощью линейки и маркера делят на секторы. Подсчет колоний
на непрозрачных средах (почвенный агар) проводят непосредственно с поверхности. Для подсчета ко
лоний используют специальные полуавтоматические счетчики. Чтобы не пропустить мелкие колонии,
чашки дополнительно просматривают под лупой.
8.1.3.2 Количественные подсчеты на агаризованных средах необходимо проводить через одно и
то же время после посева, чтобы получить сравнимые результаты.
Число бактериальных колоний в анализируемом субстрате М. КОЕ/см3, вычисляют по формуле
V
где а — среднеарифметическое число колоний при посеве данного разведения:
10 — кратность разведения;
п — степень разведения, из которого сделан посев;
V — объем суспензии, взятой для посева по 8.1.2.2—8.1.2.3, см3.
Полученное число КОЕ соответствует содержанию микроорганизмов в 1 г (см3) органического
удобрения естественной влажности.
Пример
Если для получения разведения взят 1,0 см3 суспензии и при кратности разведения 106 в посеве
обнаружено среднеарифметическое число колоний, равное 150, вычисленное число КОЕ будет соответ
ствовать содержанию 1,5 ■109 КОЕ микроорганизмов в 1 г (см3) органического удобрения естественной
влажности:
-------
М =
150 ■106
=1,5-10*.
1.0
Если в чашках не содержится ни одной колонии, то результат выражают следующим образом:
«Общее микробное число — менее 10 КОЕ/см3».
Для пересчета на 1 г абсолютно сухого субстрата необходимо результат, полученный по формуле
(1), умножить на коэффициент пересчета, который вычисляют по формуле
100
- W
где W — влажность органического удобрения. %.
8.1.3.3Наиболее вероятное количество микроорганизмов Mprob. содержащееся в 1 г органиче
ского удобрения естественной влажности, при уровне достоверности Р = 0,95. вычисляют по формуле
1
X
Mprob =
_
± 2о_ R — •
’V(3)
— Ух
где х =
“75
------
среднеарифметическое число колоний, выросших из данного разведения;
15