ГОСТ 33379—2015
В асептических условиях резиновые пробки флаконов заменяют на стерильные ватно-марлевые.
Питательную основу расплавляют на водяной бане, не доводя ее до кипения. В охлажденную до темпе
ратуры 80 °С расплавленную питательную основу добавляют 20 см3 20 %-ного раствора сернистокис
лого натрия. 2 см3 8 %-ного раствора хлорида железа и тщательно перемешивают.
Среду Вильсона — Блера используют свежеприготовленной.
6.3.2.19 Приготовление сульфит-полимиксин-неомициновой среды по Сидоренко и Пивоварову
К 1000 см3 питательного агара добавляют 10 г глюкозы. 50 см320 %-ного раствора сульфита на
трия. 10 см38 %-ного раствора сульфата сернокислого железа (II). 2000000 ЕД полимиксина и 50000 ЕД
неомицина. Среду по 9.0 см3 разливают в пробирки вместимостью 15 см3.
Срок хранения сульфит-полимиксин-неомициновой среды при температуре от 4 X до 6 °С — не
более пяти дней.
6.3.3 Приготовление реактивов
6.3.3.1 Приготовление реактивов для окраски препаратов по Граму
Приготовление раствора Люголя
1 г йода. 2 г йодистого калия растворяют в 300 см3дистиллированной воды.
Срок хранения раствора Люголя во флаконе из темного стекла — не более 24 мес.
Приготовление карболового раствора генцианового фиолетового
1 г генцианового фиолетового, 10 см3этилового спирта. 5 г фенола растирают вступке, добавляют
100 см3дистиллированной воды, фильтруют через бумажный фильтр.
Карболовый раствор генцианового фиолетового используют свежеприготовленным.
Приготовление кристаллического фиолетового
1 г генциана фиолетового. 10 см3 этилового спирта, 5 г фенола растирают в ступке, добавляют
100 см3дистиллированной воды.
Срок хранения раствора кристаллического фиолетового — не более 12 мес.
Приготовление насыщенного спиртового раствора основного фуксина
10 г основного фуксина растворяют в 100 см3 этилового спирта.
Срок хранения насыщенного спиртового раствора основного фуксина — не более 12 мес.
Приготовление основного карболового фуксина {фуксин Циля)
1 г основного фуксина, 10 см3 этилового спирта. 54 г фенола растирают в ступке, добавляют
100 см3дистиллированной воды.
Срок хранения основного карболового фуксина — не более 12 мес.
6.3.3.2 Приготовление реактива для оксидазного теста — 1 %-ного водного раствора тетраметил-
п-фенилендиамина гидрохлорида
Для приготовления 1 %-ного водного раствора тетраметил-п-фенилендиамина гидрохлорида
предварительно готовят реактив № 1 и реактив № 2.
Для приготовления реактива No 1 берут 1 г а-нафтола и растворяют в 100 см3этилового спирта.
Срок хранения реактива No 1 в темном флаконе с притертой пробкой — не более 1 мес.
Для приготовления реактива No 2 берут 1 г фенилендиаминового соединения и растворяют в
100 см3дистиллированной воды.
Срок хранения реактива No 2 в темном флаконе с притертой пробкой — не более одной недели.
Для приготовления готового раствора к трем частям реактива No 1 добавляют семь частей реак
тива No 2.
Перед использованием готовый раствор испытывают с тест-культурами микроорганизмов, даю
щих положительную (Ps. aeruginosa, Ps. fluorescens) и отрицательную оксидазную реакцию (Е. coli).
Готовый раствор используют свежеприготовленным.
6.3.3.3 Приготовление 5 %-ного раствора а-нафтола
5.0 г а-нафтола растворяют в 100 см3 этилового спирта.
Срок хранения 5 %-ного раствора а-нафтола при температуре (4 ± 1) °С — не более 6 мес.
6.3.3.4 Приготовление реактива Эрлиха на индол
Взвешивают 5,0 гпара-диметиламинобенэальдегида встеклянном стакано вместимостью 100 см3,
помещают в коническую колбу вместимостью 200 см3 и растворяют в 50 см3 этилового спирта. С по
мощью мерного цилиндра вместимостью 100 см3 медленно добавляют 50 см3 концентрированной со
ляной кислоты.
Срок хранения реактива Эрлиха в колбе с притертой пробкой при температуре 4 °С — не более
6 мес.
12