ГО С Т 32903— 2014
Т а б л и ц а 5 - Профиль градиента при определении витаминов В,. В2 и РР
Время.Скорость потока подачи
мин элюента. см’/мин
Состав подвижной фазы (элюента).
массовая доля. %
Дигидрофосфат калияАцетонитрил
0 96.0 4.0
7 96.0 4.0
8 95.0 5.0
20 1.0 80.0 20.0
25 80.0 20.0
26 96.0 4.0
31 96.0 4.0
В зависимости от типа применяемого хроматографа и хроматографической колонки допускает
ся изменение условий измерений, обеспечивающих разделение компонентов пробы, указанное в
таблице Г.1 приложения Г.
6.4.2 Построение градуировочной характеристики
Для установления градуировочной характеристики в инжектор хроматографа вводят с помощью
микрошприца 20 мм3каждого градуировочного раствора в соответствии с таблицей 4.
Для каждого градуировочного раствора выполняют два параллельных измерения в условиях
повторяемости. Компоненты идентифицируют по абсолютным значениям времени удерживания.
Вычисляют с помощью компьютерной программы обработки данных или вручную методом
наименьших квадратов градуировочные коэффициенты и устанавливают градуировочную характери
стику для площади пика каждого витамина в градуировочном растворе
S, = аС +
b,
(
2
)
гдеS, - среднеарифметическое значение площади пика /-го витамина в /-ом градуировочном рас
творе. е. о. п с;
С - среднеарифметическое значение массовой концентрации /-го витамина в /-том градуиро
вочном растворе, мг/дм3;
а. b -
градуировочные коэффициенты в уравнении прямой, вычисленные методом наименьших
квадратов по формулам
.Vии
М
N Z c
_
,
_
-
_
s
_
,
_
- X c ’ I s -
_ _ _ _ _ _
N( N\ 2
(
3
)
"5СЧ5С)
NNNN
m Z c ’ -
ь=
(4)
где
С,
- массовая концентрация /-го витамина в /-ом градуировочном растворе, мг/дм3:
S) —
площадь пика /-го витамина в /-ом градуировочном растворе, е. о. п с;
/- индекс переменной;
N -
номер градуировочного раствора.
Градуировочную характеристику, вычисленную методом наименьших квадратов, считают при
емлемой. если значение квадрата коэффициента корреляции
R?
для каждого витамина составляет не
менее 0.990.
Градуировочную характеристику строят заново в случае замены оборудования, колонок, партий
реактивов или при выявлении несоответствия метрологическим требованиям результатов контроля
стабильности по 6.4.3, но не реже одного раза в месяц.
6.4.3 Контроль стабильности градуировочной характеристики
Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят ежедневно перед началом
измерений.
7