ГО С Т 32903— 2014
Т а б л и ц а 9 - Приготовление градуировочных растворов для определения витамина В,
№ градуи
ровочногоКомпонент
раствора.
N
Объем
мерной
колбы.
см3
Способ приготовления
Массовая концен
трация в получен
ном растворе (в
пересчете на осно
вание) С,», мг/дм!
1
Тиамин
(В1)
В мерную колбу помещают 25 см” рас
твора по 7.3.5.1. доводят объем до мет
ки водой и перемешивают
1.500
2
В мерную колбу помещают 12.5 см”
3
4
раствора по 7.3.5.1. доводят объем до0.750
метки водой и перемешивают
В мерную колбу помещают 6.25 см”
50раствора по 7.3.5.1, доводят объем до0.375
метки водой и перемешивают
В мерную колбу помещают 1.25 см3
раствора по 7.3.5.1, доводят объем до0.075
метки водой и перемешивают
В мерную колбу помещают 0.25 см”
5раствора по 7.3.5.1. доводят объем до0.015
метки до метки водой и перемешивают
Действительное значение массовой концентрации витамина В, в основном градуировочном
растворе
С)мск,
мг/дм3, вычисляют по (1).
Градуировочные растворы готовят непосредственно перед выполнением измерений.
7.4 Порядок поведения определений
7.4.1 Условия хроматографических измерений
Измерения проводят при следующих условиях:
- температура окружающего воздуха ...................(25 ± 5) вС;
- рабочий диапазон длин волн для
флюориметрического детектора...........................в соответствии с таблицей 8;
- объем вводимой пробы....................................... 20 мм3;
- элю ент............................................................................. раствор дигидрофосфата калия (см. 7.3.4);
- режим элюирования ................................................. в соответствии с таблицей 10;
- скорость подачи реагента.........................................0.2 см3/мин;
- время истечения реагента........................................ 5 мин*
Т а б л и ц а 1 0 - Профиль градиента при определении витамина В,
Время.Скорость потока подачи
мин элюента. см /мин
Состав подвижной фазы (элюента).
массовая доля. %
Дигидрофосфат калияАцетонитрил
0 96.0 4.0
7 96.0 4.0
8 95.0 5.0
20 1.0 80.0 20.0
25 80.0 20,0
26 96.0 4,0
31 96.0 4.0
В зависимости от типа применяемого хроматографа и хроматографической колонки допускает
ся изменение условий измерений, обеспечивающих разделение компонентов пробы, указанное таб
лице Г.2 приложения Г.
7.4.2 Построение градуировочной зависимости - по 6.4.2.
7.4.3 Контроль стабильности градуировочной характеристики - по 6.4.3.
*Время подачи дериватизирующего реагента от момента ввода пробы (без учета времени заполнения ре
агентом реакционного модуля) до максимальной точки выхода хроматографического пика. Данная величина ис
пользуется для отключения подачи дериватизирующего реагента.
12