ГО С Т 32903— 2014
8.3 Подготовка к проведению определений
8.3.1 Подготовка хроматографа к работе
Подготовка хроматографа к работе - по 6.3.1.
8.3.2 Приготовление раствора дигидроф осф ата калия молярной концентрации 0,05
моль/дм3и 3 ед. pH
Выполняют согласно 6.3.4.
8.3.3 Приготовление градуировочных растворов витаминов В2 и В6
8.3.3.1 Приготовление основного раствора витаминов (в пересчете на основание) с массовой
концентрацией рибофлавина (витамин В2) 4,0 мг/дм3, пиридоксина (витамин Ве) 8.0 мг/дм3.
Взвешивают (0.0097 ± 0.0010) г гидрохлорида пиридоксина и (0,0040 ± 0,0010) г гидрохлорида
рибофлавина в стакане вместимостью 100 см3, растворяют в 50 см3 воды, затем переносят в мерную
колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем раствора до метки водой и перемешивают.
Раствор устойчив в течение семи дней при хранении в холодильнике при температуре не более
4 JC в герметично закрытой колбе.
8.3.3.2 Готовят ряд градуировочных растворов витаминов В2 и ВБдля построения градуировоч
ной зависимости по пяти уровням, от меньшей массовой концентрации к большей, из основного гра
дуировочного раствора в соответствии с таблицей 13.
Т а б л и ц а 1 3 - Приготовление градуировочных растворов для определения витаминов В2 и Вс.
№ гра
дуиро
вочного
раст
вора.
N
Компонент
Объем
мерной
колбы.
см3
Способ приготовления
Массовая концентра
ция в полученном рас
творе (в пересчете на
основание) С,р. мг/дм3
1
50
4.00
2.00
2
50
2.00
1.00
3
Пиридоксин
(B J
Рибофлавин
(В2)
Пиридоксин
(Во)
Рибофлавин
(В2)
Пиридоксин
100
1.00
(В .)
Рибофлавин
0.50
4
0.50
0.25
5
В мерную колбу помещают 25 см3
раствора по 8.3.3.1. доводят объ
ем до метки водой и перемеши
вают
В мерную колбу помещают 12.5
см3 раствора по 8.3.3.1. доводят
объем до метки водой и переме
шивают
В мерную колбу помещают 12,5
см3 раствора по 8.3.3.1. доводят
объем до метки водой и переме
шивают
В мерную колбу помещают 6.25
см3 раствора по 8.3.3.1. доводят
объем до метки водой и переме
шивают
В мерную колбу помещают 1.25
см3 раствора по 8.3.3.1. доводят
объем до метки водой и переме
шивают
0,10
(В2)
Пиридоксин
(ВБ)
Рибофлавин
(В2)
Пиридоксин
(ВБ)
Рибофлавин
_______
т
_______
0.05
Действительное значение массовой концентрации витаминов В2 и В* в основном градуировоч
ном растворе
СКжл,
мг/дм3вычисляют по (1).
Градуировочные растворы готовят непосредственно перед выполнением измерений.
8.4 Порядок проведения определений
8.4.1 Условия хроматографических измерений
Измерения проводят при следующих условиях:
- температура колонки................................. (25 ± 5) °С;
- рабочий диапазон длин волн для
флюориметрического детектора.............в соответствии с таблицей 12:
- объем вводимой пробы ............................. 20 мм3;
- элюент...............................................................раствор дигидрофосфата калия по 6.3.4;
14