ГОСТ 32429-2013
6 Описание метода
6.1 Оборудование
Стандартное лабораторное оборудование, в частности:
- кислородомеры и pH метры;
- оборудование для определения жесткости и щелочности воды;
- надлежащий прибор для контроля температуры, предпочтительно непрерывного действия;
- емкости, выполненные из химически инертного материала и имеющие объем
соответствующий рекомендуемой загрузке и плотности заселения;
- свежий субстрат для тупоголового гольяна и данио рерио;
- весы соответствующего класса точности (± 0.5 мг).
6.2 Вода
Для эксперимента может использоваться любая вода, которая обеспечивает условия
долговременного выживания и рост тестовых видов. Она должна иметь постоянные характеристики в
течение проведения теста. pH воды должно быть в диапазоне от 6.5 до 8.5. но во время теста это
значение должно колебаться в пределах ± 0.5. Чтобы гарантировать, что вода, используемая для
разбавления, не будет влиять на результаты эксперимента (например, путем образования
комплексов с тестируемым веществом), должны быть взяты пробы воды для анализа. Необходимо
каждые три месяца в разбавляющей воде измерять концентрацию тяжелых металлов (Си. Pb. Zn, Hg. Cd.
N и т.д.). основных анионов и катионов (Са. Mr, Na. К, Cl. S04 и т. д.), пестицидов (общее
содержание фосфор и хлорорганических веществ), содержание общего органического углерода и
сухого остатка для того, чтобы иметь уверенность в том. что вода является относительно постоянной по
своему составу. Если существуют доказательства того, что качество воды постоянно в течение года,
определения могут быть менее частыми (например, каждые шесть месяцев).
6.3 Тестовые растворы
6.3.1 Тестовые растворы требуемых концентраций готовятся путем разбавления основного
раствора. Основной раствор подготавливается путем растворения необходимых веществ в воде с
использованием механических средств (например, магнитные или ультразвуковые мешалки). Для
получения необходимого концентрированного раствора можно использовать таблицы растворимости.
Использование растворителей не рекомендуется. Однако, в случав, если это необходимо, нужно
отдельно поставить контрольную пробу с растворителем в той же самой концентрации, что и в
эксперименте.Выборрастворителябудет определенхимическимисвойствамивещества.
Рекомендуемая максимальная концентрация растворителя 100 мкл/л.
Рекомендуется минимизировать концентрацию растворителя везде, где это технически
выполнимо (в зависимости от физико-химических свойств тестируемого вещества).
6.3.2 Может быть использован динамический (проточный) тип эксперимента. Такой тест требует
установки системы непрерывного распределения и разбавления основного раствора тестируемого
вещества (например, дозаторный насос, пропорциональный разбавитель, система растворения), для
обеспечения ряда концентраций в тестовых аквариумах. Объемные скорости потока основных
растворов и разбавляющей воды должны проверяться регулярно, предпочтительно ежедневно, во
время теста и не должны меняться более чем на 10 % в течение теста. Необходимо с осторожностью
использовать низкосортные пластиковые трубки или другие материалы, которые могут содержать
биологически активные вещества. Выбирая материал для перекачивающей системы, необходимо
учитывать возможную адсорбцию испытательного вещества на этом материале.
6.4 Содержание рыб
6.4.1 Подопытные рыбы должны быть отобраны из лабораторий, предпочтительно из одной
лаборатории, которые акклиматизированы в течение, по крайней мере, двух недель до теста при тех же
условиях качества воды и освещения, которые используются в эксперименте. Важно соблюдать норму
заселения в аквариумы для каждого вида рыб.
6.4.2 После 48-часового периода акклиматизации регистрируют смертность по следующим
параметрам.
- более чем 10 % смертность выборки через семь дней: исключают из эксперимента всю группу;
- смертность между 5 % и 10 % выборки; акклиматизация в течение семи дополнительных дней;
если больше, чем 5 % смертность в течение дополнительных семи дней; исключают из эксперимента
всю группу;
- смертность меньше 5 % выборки через семь дней; рыбы допускаются к тесту.
6.4.3 Рыбы не должны получать лечение в случае болезни во время периода акклиматизации, в
период перед экспозицией или во время теста.
6.5 Предварительная экспозиция и выбор рыб
6.5.1 Рекомендуется недельный период предварительной экспозиции с рыбками, помещенными
3