ГОСТ 32429-2013
Приложение Е
(справочное)
Оценка вторичных половых признаков у тупоголового гольяна для обнаружения некоторых
веществ активных по отношению к эндокринной системе
Е.1 Краткий обзор
Потенциально важными признаками физического состояния у взрослых особей тупоголового
гольяна при проведении исследований эндокринных нарушений являются: цвет (светлый/темный),
рисунок окраски (присутствие или отсутствие вертикальных полос), форма тела (головной и грудной
отделы, увеличение брюшка) и специальные вторичные половые признаки (число и размер брачных
бугорков, размер спинной подушки и яцеклада).
Брачные бугорки расположены на голове (спинная подушка) половозрелых самцов
тупоголового гольяна и обычно расположены билатерально и симметрично (Jensen и др. 2001).
Самки и ювенильные особи обоих полов бугорков не имеют (Jensen и др. 2001). Самцы могут иметь до
восьми бугорков вокруг глаз и возле ноздрей (Jensen и др. 2001). Самое большое количество и
самые большие по размеру бугорки расположены в две параллельные линии ниже ноздрей и выше рта.
У многих рыб есть группы бугорков под нижней челюстью; возле рта в основном находятся
единичные пары, в то время как брюшко может насчитывать до четырех бугорков. Фактическое число
бугорков редко превышает 30 (обычно, от 18 до 28: Jensen и др. 2001). Бугорки в основном имеют
одинаковую форму, обычно округлые, с высотой, приблизительно равной радиусу. Большинство
репродуктивно активных самцов могут иметь сильно увеличенные бугорки, состоящие из нескольких
слившихся в один.
Некоторые типы воздействующих на эндокринную систему химикатов могут вызвать
аномальное расположение вторичных половых особенностей к противоположному полу; например,
антоганисты рецептора андрогена, такой как 17р - метилтестостерон или 17 р -треиболон, могут
вызвать развитие брачных бугорков у женских особей гольяна (Smith 1974; Ankley и др. 2001; 2003), в то
время как антагонисты рецептора эстрогена могут привести к уменьшению числа или размера
брачных бугорков у самцов (Miles-Richardson и др. 1999; Harries и др. 2000).
Ниже дано описание исследования брачных бугорков у тупоголового гольяна, основанных на
процедурах, используемых в американской лаборатории Управления по охране окружающей среды
(USEPA) в Дулуте. Миннесота. Некоторые продукты и/или оборудование могут быть замещены на
сопоставимые доступные материалы.
Исследования лучше всего проводить, используя лупу с подсветкой или бинокулярный
микроскоп с подсветкой (ЗХ). Рыба находится в дорсальном положении головой к исследователю.
a) Расположите рыбку в малой чашке Петри (например. 100 мм в диаметре) на боку хвостом
вперед. Настройте видоискатель для идентификации бугорков. Осторожно и медленно переверните
рыбу с одного бока на другой, чтобы идентифицировать области бугорков. Посчитайте и
классифицируйте бугорки.
b
) Повторите исследование на вентральной задней поверхности тела рыбы, повернув рыбу на
спину хвостом вперед в чашке Петри
c) Наблюдения должны быть проведены в течение 2 минут для каждой рыбы.
Е.2. Подсчет и классификация бугорков
Шесть определенных областей должны быть идентифицированы для оценки наличия бугорков
и их развития у взрослых особей тупоголового гольяна. Разработана таблица А.1 для картирования
расположения и количества бугорков (см. приложение А). Число бугорков регистрируется, и их размер
количественно оценивается как; с 0-отсутствие , 1-наличие . 2-увеличенный и 3—явно выраженный
для каждого организма (рис. Е.1).
14