ГОСТ 32429-2013
М Е Ж Г О С У Д А Р С Т В Е Н Н Ы ЙС Т А Н Д А Р Т
МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ ХИМИЧЕСКОЙ ПРОДУКЦИИ. ПРЕДСТАВЛЯЮЩЕЙ ОПАСНОСТЬ ДЛЯ
ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Краткосрочное определение ингибирования ароматазы и эстрогенной и андрогенной
активности: 21-дневный тест
Testing of chemicals of environmental hazard. 21-day Fish Assay: A Short-Term Screening for Oestrogenic and
Androgenic Activity, and Aromalase Inhibition
Дата введения - 2014-08-01
1 Область применения
Настоящий стандарт описывает in vivo пробит тест на группе рыб (состоящей из половозрелых
самцов и самок в репродуктивном возрасте), подвергающихся воздействию химиката в период
ограниченный их биологическим циклом (21 день). По завершении 21-дневного периода воздействия, в
зависимости от подопытного вида измеряют один или два биомаркера у самцов и самок в качестве
индикаторов эстрогенной, андрогенной активности или ингибирования ароматазы.Этими
биомаркорами являются вителлогенин (VTG) и характеристики вторичных половых признаков.
Вителлогенин измеряют у гольяна, японской медаки и данио. тогда как вторичные половые признаки
определяются только у гольяна и японской медаке.
Настоящий стандарт не позволяет обнаружить антагонисты андрогенов. Этот тест не
предназначен для идентификации конкретных механизмов гормональных разрушений, поскольку
подопытныеживотныеобладаютздоровой«гипоталамо-гипофизно-гонадной»(ГГГ)осью
гормональной регуляции и способны реагировать на вещества, воздействующие на ось ПТ на
различных уровнях.
2 Термины и определения
В настоящем стандарте применимы термины с соответствующими определениями:
2.1 величина загрузки: Живой вес рыбки в объем воды.
2.2 вителлогенин фосфолипогликопротеин (VTG): Предшественник белка желтка яйца,
который обычно синтезируется у сексуально активных самок всех яйцекладущих видов.
2.3 максимальная допускаемая концентрация (МДК): составляет приблизительно 10 % LCso.
2.4 ось HPG: Гипоталамическая гипофизарная гонадальная ось
2.5 плотность заселения: Количество рыбок в объеме воды.
3 Основные положения
3.1 Вителлогенин (VTG) обычно производится печенью самок яйцекладущих позвоночных
животных в ответ на циркуляцию эндогенного эстрогена, предшественника белков яичного желтка,
который производится печенью и затем переносится кровотоком в яичники, где используется в
развитии и изменении ооцитов. Вителлогенин практически не обнаруживаем в плазме незрелых
самок и самцов рыб. потому что они испытывают недостаток в эстрогене, однако их печень способна к
синтезу и выделению вителлогеиина в ответ на экзогенную стимуляцию эстрогена.
3.2 Измерение вителлогеиина используется для обнаружения веществ с различными
антиэстрогенными свойствами. Обнаружение антиэстрогенных химических веществ возможно через
измерение индукции вителлогеиина у самцов рыб. Индукция вителлогеиина была также
продемонстрирована после экспонирования ароматизированными андрогенами. Снижение уровня
циркулирующих эстрогенов у самок в результате, например, ингибирование ароматазы. фермента,
который превращает андрогены в эндогенные эстрогены в естественных условиях (17р эстрадиол),
приводит к снижению уровня вителлогеиина, используемого для обнаружения ингибиторов
ароматазы. Биологическая значимость реакция вителлогеиина в ответ на ингибирование эстрогена
/ароматазы установлена и хорошо изучена. Однако производство VTG у самок также может быть
изменено токсическим действием веществ, не обладающих эндокринной токсичностью (например.
гепатотоксичность).__________________________________________________________________________
Издание официальное
1