ГОСТ 31926—2013
повторныйпассажнаудвоенном количествеэмбрионов. При подтверждении положительногорезульта
та РГАсерию лекарственного средства бракуют.
- При определении метапневмовирусов проводят три последовательных пассажа на первичной
культуре клеток куриных фибробластов (REO) или VERO. Если после второго пассажа на культуре кле
ток куриных фибробластов присутствует цитопатогенное действие, характерное для реовируса или
метапневмовируса птиц, серию лекарственного средства бракуют.
- Прииспытаниинаналичиеактивноговирусавантирабическихвакцинахвакцинувводятмышамв
мозг. Наблюдение заживотными проводятв течение21 сут. Вирусбешенства ввакцинесчитают инакти
вированным. если мыши остаются живыми. При заболевании хотя бы одной мыши с клиническими при
знаками бешенства серию вакцины бракуют. Мозг погибших мышей исследуют методом
иммунофлуоресценции. В мазках из мозга мышей вирус бешенстваобнаруживаться недолжен.
11 Определение аллергизирующего действия лекарственного средства
Аллергизирующее анафилактическое действие лекарственного средства определяется путем
сенсибилизации морских свинок.
Для сенсибилизации морских свинок (масса 200—250 г) могут быть использованы разные схемы
введения лекарственного средства. В случаях, когда курс вакцинации предусматривает несколько вве
дений. целесообразно применять следующую схему: первая инъекция подкожно, две последующие
(с интервалом 1сут) — внутримышечно. Если вакцинация предусматривает введение лекарственного
средстваоднократно, допускаетсяоднократнаясенсибилизация. Числоживотныхв группедолжно быть
не менеедесяти. Разрешающую инъекцию выполняют внутривенно или внутрисердечночерез две-три
недели или в более отдаленный срок (в зависимости от свойств лекарственного средства). В случае
если препарат является сорбированным, для разрешающей инъекции следует использовать также и
несорбированный полуфабрикат. Сенсибилизирующая иразрешающаядозы испытуемоголекарствен
ногосредствадолжны бытьприближены крекомендуемымдляпрактического применения, приэтомраз
решающая доза не должна быть меньше сенсибилизирующей. Окончательную величину дозировок
устанавливаютэкспериментальным путем.
После разрешающей инъекциинаблюдение заживотными ведутв продолжение 30 мин. Чаще все
гошок проявляется в течение нескольких минут, его тяжестьоценивают последующей шкале:
А/+/ — редкое почесывание лапами морды, взъерошивание шерсти, понижение температуры
более чем на 1°С;
Б/♦♦/ — частое почесываниелапами морды, возможнопериодическоечихание, понижениетемпе
ратуры;
В/+++/ — спастический кашлевый синдром, возможное падение на бок. мочеиспускание, дефека
ция;
Г/++++/ — конвульсивные судороги, резкое нарушение дыхания, гибельживотного в течение пер
вых5—7 мин;
Д — реакцияотсутствует.
Индекс синдрома в группе И вычисляют поформуле Веигла (1960)
Н - А - - Ь 2 - В З - Г - 4(1)
А т Б ^ В ^ Г - Д’
где А. Б. В. Г.Д — число животных сданной выраженностью синдрома;
1.2.3.4 — цифровая индикация, которая вводится для исчисления тяжести реакции погруппе в
целом.
Изучаемые лекарственные средства (за исключением гетерологичных сывороток) не должны
вызвать развития смертельного шока.
Выраженностьанафилаксии после внутривенного или внутрисердечного введения разрешающей
дозы препаратадолжна соотноситьсясрезультатами, зафиксированнымив группе морскихсвинок, под
готовленных к шоку, чаще всего сенсибилизацией нормальной гетерологичной сывороткой (положи
тельный контроль). 100 %-иая гибель животных в данной группе обычно наступает в результате
предварительногоподкожноговведения0.1 см3лошадинойсыворотки, задве-три недели до разрешаю
щейдозы 0.1—0.5 см3. Если сыворотка лиофилизирована. для сенсибилизации применяют 2,5—3.0 мг
на 100 г массы тела животного (разрешающая доза 14— 16 мг на 100 г массы). В тех случаях, когда при
производстве лекарственного средства применяют гетерологичный белок, его используют при поста
новке положительного контроля.
6