ГОСТ 31926—2013
Т а б л и ц а 4 — Схема эксперимента «Количественный анализ»
Раст вое
Исходный раствор
Растворитель
Фактор
разведения
Конечная
концентрация КСЭ
в испытуемой
растворе
Количество
повторностей
А
—
Испытуемое лекарственное
средство
Вода для
Л
А
Л
-тес-
та
—
—
1
2
4
8
и т. д. до МДР
—
2
2
2
2
В
1
2 X
2
Испытуемое лекарственное
средство, содержащее КСЭ
концентрацией 2 X
Испытуемое лека-
рственное средст-
во
С
Вода для
Л
А
Л
-тес-
та
Раствор КСЭ в воде для
Л
А
Л
-тестаконцентрацией
2 X
1
2
4
8
2 X
1 X
0.5 X
0,25 X
2
2
2
2
D
Вода для
Л
А
Л
-теста
—
—
—
2
15.2 Результаты и интерпретация
Анализ считаютдостоверным, если для раствора D (отрицательный контроль) получены отрица
тельные результаты в обеих повторностях; длярастворов С(контрольчувствительности
Л
А
Л
-реактива)
среднегеометрическое значение концентрации бактериальныхэндотоксинов составляетне менее 0.5 X
и не более 2 /. для раствора В (положительный контроль испытуемого образца) получены положитель
ные результаты в обеих повторностях; для растворовА конечнойточкой реакции является положитель
ный результат, полученныйдля наибольшего разведения испытуемоголекарственного средства.
Значение произведения фактора этого разведения на величину чувствительности
Л
А
Л
-реактива
(X)равно концентрации эндотоксина в растворе А, полученной дляданной повторности. Среднегеомет
рическоезначение концентрацииэндотоксина рассчитывают, какописано в 13.4.
Если вовсех повторностяхсерии растворовА получены отрицательные результаты, то концентра
ция бактериальных эндотоксинов в испытуемом лекарственном средстве менее чувствительности
Л
А
Л
-реактива. умноженной на наименьший фактор разведения.
Кроме приведенных методов, для определения содержания бактериальныхэндотоксинов в испы
туемом лекарственном средстве могут использоваться фотометрические методы (С, D. Е и F). описан
ные в Европейской фармакопее[3].
16 Турбидиметические методы (С и
F)
Данные методы относятся кфотометрическим методам измерения увеличения степени мутности.
Взависимостиотпринципа, положенногов основу проведенияиспытания, указанныеметоды классифи
цируют как турбидиметрический метод конечной точки либо турбидиметрический кинетический метод.
16.1 Турбидиметрический методконечной точки(метод F)основанна количественнойзависимос
ти концентрацииэндотоксиновот степени мутности(поглощение или пропускание) реакционной смеси в
конце инкубационногопериода.
16.2 Турбидиметрический кинетический метод (метод С)осиован на измерении времени, необхо
димого для достижения предварительно определенной величины поглощения, или степени мутности
реакционной смеси.
Испытаниепроводят при температуре инкубации, рекомендованной производителем
Л
А
Л
-реакти
ва [обычно (37i 1) °С].
17 Хромогенные методы (Ои£)
Данные методы используют для измерения количества хромофора, высвободившегося из соот
ветствующего хромогенного пептида в результате реакции эндотоксинов с
Л
А
Л
-реактивом. В зависи
мости от принципа, положенного в основу испытания, этот метод классифицируют как хромогенный
метод конечной точки илихромогенный кинетический метод.
13