ГОСТ 31926—2013
для инъекций или растворлекарственногосредствасчитаютпирогенными. В случаях, когдасуммаповы
шений температуры у трех кроликов находится в пределах от 1,5 °С до 2,2 °С, испытание повторяют
дополнительно на пяти кроликах. В этом случае воду для инъекций или раствор лекарственного
средства считают непирогенными, если сумма повышенийтемпературы у всех восьми кроликов не пре
вышает3,7 ’С. Если жеэта сумма равна 3,8 °С или больше, водудля инъекций или растворлекарствен
ного средства считают пирогенными.
В частнойфармакопейной статье могут бытьуказаныдругие пределы отклонения температуры.
Если вчастнойстатье на лекарственное средствонетдругихуказаний, случаипонижениятемпера
туры у кроликовпринимают за ноль.
Кролики, бывшие в опыте, могут быть использованы для определения пирогенности повторно, но
не ранее чем через трое суток, если введенный им до этого раствор лекарственного средства или вода
для инъекций были непирогенными. Если же введенный растворлекарственного средства или вода
для инъекцийоказалисьпирогенными, кролики могут бытьиспользованы длядальнейших опытов
черездве недели. При повышениитемпературы у кроликоввподобныхслучаяхна 1.2°С
иболееонииспользуются через три недели. Если исследуемые вещества обладают антигенными
свойствами, то одних и тех же кроликов нельзя использовать для испытания повторно (если нет
специальных указаний в частной статье).
Для испытания лекарственных средств, введение которых требует предварительной подготовки
или специальныхусловий введения, следует руководствоватьсядополнительными указаниями, приве
денными в нормативной документации на конкретное лекарственное средство.
13 Определение бактериальных эндотоксинов
Бактериальные эндотоксины определяют в инъекционных лекарственных средствах, предназна
ченных для парентерального и интратекального применения, и в субстанциях, используемых для их
изготовления. Метод дает возможность проводить постадийный контроль содержания эндотоксинов в
процессе производства инъекционныхлекарственныхсредств.
Содержание бактериальныхэндотоксинов выражается вединицах эндотоксина (ЕЭ) международ
ного стандарта эндотоксина.
Определение содержания бактериальных эндотоксинов проводят с использованием реактива,
представляющего собой лизат клеток крови (амебоцитов) мечехвоста Limulus polyphemus
(
Л
А
Л
-реактив) или Tachypleus tridontatus (ТА
Л
-реактив). В основе метода лежит способность амебоци
тов мечехвоста специфически реагировать с эндотоксинами грамотрицательных бактерий (липополи-
сахаридами,
Л
ПС).
В результате реакции с эндотоксином происходит помутнение прозрачной реакционной смеси и
увеличение ее вязкости вплотьдо формирования плотного геля, образование которого служит индика
тором наличия в пробе бактериальныхэндотоксинов.
Проводимый таким образом анализ называется гель-тромб тест. Этот анализ позволяет коли
чественно определить содержание бактериальных эндотоксинов в испытуемом препарате (коли
чественный анализ) или оценить, соответствует ли содержание эндотоксинов предельному значению,
установленномудля испытуемого препарата (качественный анализ).
Качественный анализ является основным методом проведения анализа по показателю «Бактери
альные эндотоксины», этот же анализявляетсяарбитражным.
Возможно проведение определения содержания бактериальных эндотоксинов иными методами
или модификациями при условии, что результаты не противоречат результатам основного метода.
Метод определения бактериальных эндотоксинов с помощью
Л
А
Л
-реактива является альтерна
тивным. наряду с ним могут быть использованы и другие методы (определение пирогенности на кро
ликах).
13.1 Подготовка к испытанию
13.1.1 Подготовка посуды
Стеклянная и пластиковая посуда, используемая в
Л
А
Л
-тесте. не должна содержать бактериаль
ныеэндотоксины в количествах, определяемых втесте, и недолжна оказывать влияния наход реакции.
Посуда можетбытьдепирогенизирована при температуре250 °С не менее 30 мин.
13.1.2 Стандарты эндотоксина
Содержание бактериальныхэндотоксинов выражается вединицах эндотоксина (ЕС) международ
ного стандарта эндотоксина. При проведении анализа используют контрольный стандарт эндотоксина
(КСЭ), активность которого установлена по международному стандарту эндотоксина.
8