ГОСТ 32010—2013
На висмут-сульфитном агаре проводятучет ферментации глюкозы, обнаружениясульфитредуци-
рующихсвойств.
Бактерии рода Shigella необладают сульфитредуцирующими свойствами.
8.4.2 Посевы на чашках Петри по 8.4.1 переворачивают на крышкудном вверх и помещают в тер
мостат притемпературе (37
а
1) °С и инкубируют в течение (24
а
2) ч.
8.4.3 После инкубации просматривают чашки с посевами и отмечают присутствие типичных для
бактерий рода Shigella колоний и атипичных колоний, которые могут быть отнесены к бактериям рода
Shigella. Отмечают их местоположениенадне чашек.
Типичные колонии бактерий рода Shigella, вырастающие на XLD агаре, имеют красный цвет, кото
рый принадлежит цвету индикатора.
Типичные колонии бактерийродаShigella, вырастающие нагектоеновомэнтероагаре, имеютзеле
ный или голубоватый цвет.
Типичные колонии бактерий рода Shigella, вырастающиенадезоксихолатном цитратном агаре, на
сальмонелла-шигелла агаре, на средах Эндо. Плоскирева, Левина, круглые бесцветные или слегка
розоватые.
Типичные колонии бактерий рода Shigella, вырастающие на висмут-сульфитном агаре, имеют
серо-зеленый цвет.
При отсутствии в посевах на селективно-диагностических средах типичных для бактерий рода
Shigella колоний дают заключение об отсутствии бактерий рода Shigella в анализируемой пробе про
дукта.
При наличии хотя бы на одной селективно-диагностической среде типичных колоний проводят
подтверждение принадлежности их кбактериям рода Shigella.
8.5Подтверждение принадлежности выделенных бактерий кроду Shigella
8.5.1 Общие положения
Для определения биохимических характеристик выделенных бактерий допускается использова
ние идентификационных наборов. Эти наборы используют всоответствии с инструкцией.
Длябиохимической идентификациидопускается использованиетест-систем промышленногопро
изводства. разрешенных кприменению вустановленном порядке.
8.5.2 Отбор колоний для подтверждения
Для подтверждения берут посев из каждой селективной среды (8.4) в чашку Петри по 8.4.1 (две
чашки нормальногоразмера считаютзаодну),сначалаоднутипичную колонию, если она окажетсяотри
цательной. берутеще четыре колонии.
Для идентификации в случае эпидемиологической ситуации одновременно отбирают пять коло
ний. Если наодной чашке меньше пяти типичных колоний, то отбираютвсе типичный
ко
л
онии
.
Переносятотобранные
ко
л
онии
на скошенную поверхность питательного или ГРМ-агара вчашках
или пробирках(5.2.4)или мясо-пептонногоагара (5.2.5), для идентификацииотбираютполностьюизоли
рованные колонии. Посевы инкубируют при температуре (37 ± 1)°С в течение (24
а
2)ч.
Для биохимической исерологической идентификации используютчистые культуры бактерий.
Изотобранныхдля биохимической идентификации колоний приготовляют мазки иокрашивают по
Граму по ГОСТ 30425.
Бактерии рода Shigella являются грамотрицательными прямыми палочками.
Допускаетсяокраску по Грамузаменятьтестом Грегерсена. Для этого на предметном стекле в кап
ле 3%-ного водногораствора калиягидроокисиэмульгируюткультуру микроорганизмов, взятую из коло
нии с агаризованной среды. Если через несколько секунд взвесь ослизнет и за петлей потянутся
слизистые нити, то это указывает на принадлежность анализируемой культуры к грамотрицательному
виду бактерий. У грамположительных бактерий слизистыхнитей необразуется.
8.5.3 Биохимическое подтверждение
У отобранных и предварительно пересеянных культур изучают характер роста на TSI агаре, или
агаре Клиглера. или средеОлькеницкого. возможность расщеплениямочевины, образованияацетоина,
утилизации цитрата, наличие L-лизиндекарбоксилазы и подвижность.
8.5.3.1 Общие положения
Петлей инокулируют специфические среды с 8.5.3.2 по 8.5.3.7 каждой культурой, полученной из
колонийпо 8.5.2.
8.5.3.2 TSI агар (5.2.8), среда Олькеницкого или агар Клиглера
Засевают штрихом скошенную поверхностьагара иуколом столбик. Инкубируют при температуре
(37
а
1) ВСв течение (24 ± 2)ч.
6