ГОСТ 31792—2012
Для анализа отбирают из каждой партии рыбы не менее трех тушек общей массой 0,5—1,0 кг. при
необходимости размораживают образцы при комнатной температуре.
Примечание — Если экземпляры рыбы имеют массусвыше 1кг,допускается использоватьдля анализа
серединную частьтушки оттрехэкземпляров рыбыобщей массой 1кг.
Отделяют голову и внутренности рыбы и гомогенизируюттушку на шнековой мясорубке с диамет
ром отверстий измельчителя не более 3 мм. Полученный фарш пропускают через мясорубку повторно.
Отбирают для анализа образец фарша массой 50 г, остаток замораживают при минус 20 °С и хранят в
стеклянной таре до завершения анализа.
Печень рыбы размораживают, гомогенизируют образец массой не менее 100 г на шнековой мясо
рубке. Если рыба не разделана, размораживают тушки и извлекают печень не менее чем от трех экзем
пляров. так чтобы масса образца была не менее 100 г.
Неочищенные щупальца кальмара размораживают, отбирают пробу массой 0.5—1кг, гомогенизи
руют на шнековой мясорубке с диаметром отверстий измельчителя не более 3 мм. Полученный фарш
пропускают через мясорубку повторно. Отбирают для анализа образец фарша массой 50 г, остаток за
мораживают при минус 20 “С и хранят до завершения анализа.
У мелких ракообразных (креветок) отделяют голову и кишечный канал, гомогенизируют не очи
щенные от панциря тушки так, чтобы масса пробы составляла не меньше 100 г.
Пробы рыбьего жира используют без подготовки.
7 Проведение испытаний
7.1 Экстракция ПХДД/ДФ
Извлечение ПХДД/ДФ из образца проводится методом колоночной экстракции. Навеску гомогени
зированного образца взвешивают в стакане вместимостью 250 см3 с точностью до 0,01 г, добавляют к
нему 120—150 г безводного Na2S04 и тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Образец с
добавленным Na2S04выдерживают в течение 1ч, периодически перемешивая, при необходимости до
бавляя некоторое количество Na2S04 Перетирают образец пестиком в стеклянной стулко. Полностью
высушенный образец представляет собой легко пересыпающуюся массу.
Для анализа рыбы и тканей с низким содержанием липидов используют навеску 15—20 г. при ана
лизе печени, гонад, мышц с высоким содержание липидов — 6—8 г.
Экстракцию образца проводят в стеклянной колонке с внутренним диаметром 30 мм и высотой
рабочей части 30 см, имеющей в своей нижней части впаянный стеклянный фильтр Шотта и снима
ющийся тефлоновый кран. На стеклянный фильтр помещают слой кварцевой ваты СКВ и уплотняют ее
стеклянной палочкой. Помещают 1/3 массы образца в колонку; в следующую 1/3 массы сначала
вносят 50 мкл изотопно-меченого раствора суррогатного стандарта S/S-1, перемешивают стеклянной
палочкой, а затем помещают в колонку; после этого в колонку переносят остаток пробы и уплотняют
содержимое колонки постукиванием.
Экстрагируют ПХДД/ДФ. пропуская чероз колонку с пробой 300 см3 смеси гексан-дихлорметан
(1:1) со скоростью 3—4 мл/мин. Вытекающий из колонки экстракт-элюат собирают в круглодонную кол
бу вместимостью 500 см3.
Экстракт-элюат концентрируют на роторном испарителе при температуре 50 ’С до объема около
50 см3. Взвешивают грушевидную колбу 100 см3 и количественно переносят в нее сконцентрированный
экстракт, обмывая стенки колбы смесью гексан-дихлорметан (1:1). Экстракт концентрируют на
ротор ном испарителе до объема около 1 см3, добавляют около 1 см3 дихлорметаиа и очищают
методом колоночной хроматографии.
Пробу рыбьего жира массой 1 г растворяют в 20 см3смеси гексан-дихлорметан (1:1) и очищают
методом колоночной хроматографии.
7.2 Очистка экстракта методом колоночной хроматографии
7.2.1 Отделение липидов и высокомолекулярных соединений методом голь-фильтрации
Из подготовленной колонки Bio-Beads SE-X3 сливают через тефлоновый кран растворитель и,
не допуская высыхания верхнего слоя, промывают колонку, пропуская последовательно 35 см3 смеси
метанол-дихлорметан (1:4) и 65 см3 смеси гексан-дихлорметан (1:1). Смесь такого же состава, гексан-
дихлорметан (1:1), используют в качестве элюента.
11