ГОСТ 20264.3—81 Стр. 5
По истечении этого времени в пробирки с реакционной смесью
добавляют по 2 см* 15 %-ного раствора сернокислого цинка для
инактивации фермента и осаждения продуктов гидролиза и вы
нимают из термостата.
Содержимое каждой пробирки тщательно перемешивают путем
встряхивания не менее 10 раз и фильтруют через фильтр.
Если фильтрат будет мутным, то его необходимо заново про
фильтровать Зерез тот же фильтр до получения прозрачного раст
вора. Полученный раствор является исследуемым.
Одновременно готовят контрольный раствор. Для этого в про
бирку наливают 2 см3 15 %-ного раствора сернокислого цинка,
10 см* исследуемого ферментного раствора и 20 см* субстрата.
Измерение проводят на интерферометре. Для этого исследуе
мый раствор наливают в левое отделение кюветы интерферометра
с длиной грани 4 см. а контрольный раствор в правое отделенно
и измеряют величину смещения интерференционных полос, воз
никающую вследствие различия показателей преломленияконт
рольного н .исследуемого растворов. Отсчет ведут по шкале бара
бана прибора.
Для обеспечения точности анализа необходимо разведение
ферментных препаратов подбирать таким образом, чтобы полу
чать показания прибора от 400 до 1250.
2.5. Об р а б о т к а р е з у л ь т ат о в
Пектолитнческую активность (ПкС) в ед/г вычисляют по фор
муле
(1.03425.АС-Я-И9.62
ПкС° --------яГШ5----------
гдеп — показание прибора для данного разведе
ния;
т — количество ферментного препарата, со
держащееся в 10 см3ферментного раство
ра, взятого на определение, г;
0,06425, 19.62 и 1000 — постоянныекоэффициенты, полученные
при математической обработке экспери
ментальных данных по изучению зависи
мости между количеством образующихся
продуктов гидролиза пектина в условиях
метода и количеством единиц активности
фермента, взятого на анализ;
К — поправочный коэффициент.
За окончательный результат принимают среднее арифметиче
ское значение активностей, полученных при анализе двух навесок.
Из каждой навески делают не менее трех разведений. Допускае мое
расхождение между значениями активностей не должно пре вышать
5 %.
Вычисление проводят до 0.1.
35