ГОСТ I» 51352-99
В случае экспериментальной проверки качества наборов, предназначенных для определения
антигена (антител) в сухих пятнах крови, тест на «линейность* не проводят.
Козффициент вари ации
При определении коэффициента вариации следует использовать аттестованные контрольные
сыворотки (плазмы, сухие пятна крови) с низким, средним или высоким содержанием анализиру
емого антигена. Контроль воспроизводимости проводят в восьми-десяти повторностях. Воспроиз
водимость проверяют как для одного набора, так и для разных наборов одной серии и наборов
разных серий.
Значение коэффициента вариации К.В, %, определяют по формуле
где С, — значение каждого измерения концентрации анализируемого антигена в контрольной
сыворотке:
С — среднее арифметическое значение концентрации анализируемого антигена в контроль
ной сыворотке;
I — знак суммирования:
п — число определений.
Воспроизводимость результатов считают удовлетворительной, если значение К.Вне превышает
8 % при проведении анализа в биологических жидкостях и 15 % —при проведении анализа в сухих
пятнах биологических жидкостей.
Интерсепт
Значение интерсепта определяют по калибровочному графику, построенному в координатах
logii—log (на оси ординат откладывают значение соотношения скоростей счета калибровочных проб
— в, и нулевой калибровочной пробы — В{1. а на оси абсцисс —значение концентрации антигена в
логарифмическом масштабе). Если работа набора основана на принципе конкурентного
связывания, то используют соотношение Я, Дх 100. если на принципе сэндвич-варианта
—соотношение
|(Д —3i)/(£«,м—Д|) х 100|. Значение интерсепта выражают в тех же единицах, что и значение
концентрации анализируемого антигена.
При контроле качества наборов для радно иммунол ог ического анализа обычно пользуются
тремя значениями ннтерселта —20 % (25 %), 50 % и 80 % (75 %), хотя допускаются и другие
варианты. Отрезок калибровочного графика, ограниченный значениями 20 % и 80 % интерсепта, —
это «рабочий» отрезок калибровочного графика, являющийся наиболее чувствительной его частью.
Значение 50 % интерсепта должно лежать на самой крутой части калибровочного графика и должно
соответствовать одной и той же средней концентрации анализируемого антигена в пределах
установленных колебаний.
Значения интерсепта отражают стабильность концентрации антигена в анализируемой пробе
в течение длительного времени; эти значения не должны в большой степени варьировать от набора
к набору по наборам конкретного вида, так как от этого зависит достоверность получаемых в
клинической практике результатов при использовании наборов разных серий.
Концентрация анализируемого антигена в контрольной сыворотке (плазме,
сухом пятне крови)
Для проверки правильности (достоверности) определения указанной концентрации использу
ют метод, основанный на применении контрольных сывороток (плазм, сухих пятен крови) с
известной концентрацией анализируемого антигена, которые по составу и остальным свойствам
должны быть наиболее близки к образцам анализируемого материала (во избежание
«матриксного эффекта*). Наборы для радиоиммунологическогоанализа, как правило, комплектуют
контрольными сыворотками с известным содержанием анализируемого антигена. Сравнение
полученной в резуль тате определения и указанной в паспорте на набор концентрации позволяет
оценить достоверность (правильность) ее определения конкретным набором для
радиоиммунологического анализа.
4.2.1.1.1 Наборы для и м м у н ор а д и ом етр и чее к о г о а н а л и за
Экспериментальная проверка качества этих наборов включает в себя определение следую
щих показателей: общая радиоактивность меченого компонента —по формуле (1) или по
формуле (2); тотальная (общая) радиоактивность; соотношение скоростей счета калибровочных
проб: / ? „ <. . . < Вимс’, скорость счета в калибровочной пробе, не содержащей антиген (антитела);
отношение скорости счета в калибровочной пробе с максимальным содержанием антигена к
(S)
7