ГОСТ I*51352-99
Концентрацию анализируемого вещества (активность фермента) в контрольном лабораторном
растворе С определяют по формуле
С =
(
Ю
)
где £хл — среднее арифметическое значение ОН контрольного лабораторного раствора, ед. опт.
_плоти.;
£’ка1 — среднее арифметическое значение ОН калибратора, ед. опт. плоти.;
Склл— концентрация анализируемого вещества (активность фермента) в калибраторе.
В ряде случаев, если это предусмотрено инструкцией по применению набора, допускается
определять концентрацию анализируемого вещества (активность фермента) по калибровочному
графику.
Ятя определения активности фермента кинетическим методом по фактору в измерительную
кювету спектрофотометра вносят сыворотку (плазму) крови и все компоненты набора, предусмот
ренные инструкцией по его применению, преннкубируют (в случае необходимости) в течение
указанного в инструкции времени. После этого определяют (согласно инструкции) изменение ОН
анализируемой пробы во времени.
Изменение ОН (Д £/мин) определяют по формуле
Д £7мин
Д£.
(П)
где Д£п — изменение ОН пробы, ед. опт. плоти.;
/ — интервал времени между определениями, мин.
Определение чувствительности в одной и той же пробе сыворотки (плазмы) крови проводят 5
раз.
Среднее арифметическое значение изменения ОН анализируемой пробы рассчитывают по
формуле (9).
Активность фермента А определяют по формуле
А в Д £7мин х F,
02)
где Д£/мин — среднее арифметическое значение изменения ОН пробы в минуту;
F— фактор пересчета, £/дм’.
Фактор пересчета Fопределяют по формуле
F .. v * iQ1(13)
ex v *
где У— конечный объем измеряемой пробы, см5;
v — объем добавленной пробы сыворотки крови, см3;
е — коэффициент молярной экстинкнии NADH в условиях определения, см-1х ммоль-1;
10’— коэффициент пересчета для выражения активности фермента в £/дм5, —
и указывают в паспорте на набор.
Полученное значение характеризует чувствительность, которую следует выражать в значениях
концентрации анализируемого вещества (активности фермента).
Экспериментально установлено, что обычно значение чувствительности в наборах для фото
метрического анализа равно среднему арифметическому значению холостой пробы плюс За.
Соответствие калибратора контрольному лабораторному раствору
В том случае, когда в комплект набора включен калибратор, не являющийся отдельным
коммерческим продуктом, для проверки калибратора необходимо проведение теста на соответствие
калибратора контрольному лабораторному раствору анализируемого вещества с концентрацией,
равной концентрации калибратора.
В один ряд пробирок (по 5—7 шт.) вносят контрольный лабораторный раствор анализируемого
вещества, вдругой ряд пробирок (по 5—7 шт.) —катибратор. после чего добавляют все компоненты
10