ГОСТ I» 51352-99
антисыворотки (антител). Затем проводят все процедуры, предусмотренные инструкцией по приме
нению набора.
Значение неспецифического связывания Ви, %, рассчитывают по формуле
Вн »х 100,(4)
где В — среднее арифметическое значение скорости счета в отдельных пробирках, имп/мин;
Т — среднее арифметическое значение тотальной радиоактивности, имп/мин.
Значение неспеннфического связывания должно быть не более 5 %.
При использовании твердофазного метода значение неспецифического связывания не опреде
ляют.
Соотношение скоростей счета калибровочных проб
Для оценки правильности работы системы для радиоиммунологнческого анализа необходимо
проводить определение соотношения скоростей счета (имп/мин) калибровочных проб. Значения
скоростей счета калибровочных проб могут иметь прямую зависимость от концентрации
анализи руемого антигена (или антител):< __< В^ЛХС(сэндвич-вариант), или обратную: iS;, > . . .
> fi4Ulu (метод конкурентного связывания).
Соотношение скоростей счета калибровочных проб с максимальным и
минимальным содержанием антигена (антител) и калибровочной пробы, не
содержащей антиген (антитела)
Наклон калибровочной кривой в данной точке является одним из факторов, который опреде
ляет разрешающую способность и точность системы для измерения соответствующей концентрации
анализируемого антигена. Значение соотношения скоростей счета калибровочной пробы с мини
мальным содержанием антигена и калибровочной пробы, не содержащей антиген \(В^ли—В,{)/(В{,—
—В,,) х 100|, может влиять на значение чувствительности системы для радиоиммунологнческого
анализа. Соотношение же скоростей счета калибровочной пробы с максимальным содержанием
антигена и калибровочной пробы, не содержащей антиген \{BViM—Bu)/(Bn—B„)
у
.
100|,
х о тя
и не
отражает разрешающую способность отдельных участков калибровочного графика, однако является
одним из показателей стабильности системы для радиоиммунологнческого анализа при сравнении
разных наборов одной серии и наборов разных серий.
Допускается определять соотношение скоростей счета калибровочной пробы с минимальным
содержанием антигена и калибровочной пробы с максимальным содержанием антигена |(#И1Ш—
—Ви)/(В„акс—Дм)х 100| и соотношение скоростей счета предпоследней калибровочной пробы (В11р) и
калибровочной пробы с максимальным содержанием антигена |(Z?„p—BU)/(BUM6—В„) х 1001.
Чу в ст в и т е л ь н о с ть
Значение чувствительности определяют следующим образом: в пробирки (8—10 шт.) вносят
нулевую калибровочную пробу и все компоненты набора, предусмотренные инструкцией по его
применению, после чего проводят все процедуры определения. На основании полученных данных
вычисляют среднее квадратическое отклонение о по формуле
о л
-
/
и
I
в , - в у
(5)
П- 1
где В, — значение скорости счета меченого соединения каждого измерения в пробирках с
_нулевой калибровочной пробой, имп/мин;
В — среднее арифметическое значение скорости счета меченого соединения в пробирках с
нулевой калибровочной пробой, имп/мин;
I — знак суммирования;
п — число определений.
На оси ординат калибровочного графика откладывают значение (#„—2о) —если применяют
принцип конкурентного связывания, или (Д,+2о) —если используют сэндвич-вариант; из получен
ной точки проводят прямую, параллельную оси абсцисс, до пересечения с калибровочным графиком;
из точки пересечения опускают перпендикуляр на ось абсцисс.
Соответствующая этому значению концентрация характеризует чувствительность, которую
следует выражать в значениях концентрации анализируемого вещества.
Значение чувствительности зависит от крутизны калибровочного графика в области низких
5