ГОСТ Р 70393—2022
7.3.2 Полуколичественный метод посева тампоном
Для проведения исследования используют панель тест-штаммов* микроорганизмов, которая
включает аэробные и факультативно-анаэробные бактерии, облигатные анаэробные бактерии и требо
вательные бактерии.
Для контроля качества рекомендуется отбирать тест-штаммы, принадлежащие к каждой из пере
численных групп (аэробные и факультативно-анаэробные, облигатные анаэробные и требовательные
бактерии).
Все образцы транспортных сред тестируют параллельно с одним и тем же исходным посевным
материалом для каждого используемого микроорганизма.
7.3.2.1 Приготовление рабочих культур
Лиофилизированные тест-штаммы восстанавливают и выращивают на соответствующих несе
лективных средах в необходимых условиях, определенных инструкциями коллекций микроорганизмов.
Выросшие штаммы можно хранить в соответствующей криозащитной среде при температуре не выше
минус 50 °С (предпочтительно при температуре ниже минус 70 °С) и использовать для тестирования.
Примечание — Время от подготовки суспензии микроорганизмов до инокулирования в транспортную
среду не должно превышать 20 мин для аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов и 10 мин для
облигатных анаэробов.
При необходимости суспензии тест-штаммов в криозащитной среде размораживают и высевают
на соответствующие питательные среды для приготовления рабочих культур. В качестве альтернативы
для тестирования можно использовать субкультуру, не допуская более пяти пересевов.
7.3.2.2 Приготовление инокулята и инокуляция в транспортные среды
Из изолированных колоний тестируемых микроорганизмов готовят суспензии в стерильном
0,85 %-ном растворе хлорида натрия с pH 6,8—7,2, используя стандартный образец мутности бактери
альных взвесей**.
Рекомендуемая плотность суспензии соответствует приблизительно 1 * 109клеток/мл.
Примечание — Концентрацию исходного инокулята проверяют путем десятикратных серийных раз-
ведений до 10“2, и по 0,1 мл из каждого разведения в двух повторах засевают на чашки Петри с соответствующей
неселективной средой и инкубируют. Допустимые пределы инокулята должны находиться в диапазоне от 1 * 108 до
1 х 109КОЕ/мл.
Используя метод серийных десятикратных разведений, исходную суспензию микроорганизмов
разводят в стерильном 0,85 %-ном растворе хлорида натрия с pH 6,8—7,2 до разведений 10~3—10-5, что
соответствует концентрации 106—104 клеток/мл.
Примечание — Для исследований чрезмерного роста проводят дополнительное разведение 10_6для
аэробных бацилл. Исследования чрезмерного роста при хранении в транспортных средах проводят при темпера
туре от 2 °С до 8 °С.
Пример —Для исследования чрезмерного роста используют Р. aeruginosa В-7901 ГКПМ-Оболенск.
Полученные суспензии тест-штаммов разливают по 0,1 мл (при использовании стандартных там
понов из крученого волокна или флокированных тампонов) в пробирки или в лунки микротитрационных
планшетов.
Примечание — Для тампонов из поролона и мини-тампонов в пробирки или лунки разливают необхо
димые объемы в соответствии с таблицей 1.
* Например, Р. aeruginosa В-7901 ГКПМ-Оболенск (аналог АТСС BAA-427), S. pyogenes АТСС 19615,
S. pneumoniae В-7398 ГКПМ-Оболенск (аналог АТСС 6305), Н. influenzae В-7901 ГКПМ-Оболенск (аналог
АТСС 10211), В. fragilis АТСС 25285, Р. anaerobius АТСС 27337, F. nucleatum АТСС 25588, Р. acnes АТСС
6919, Р. melaninogenica АТСС 25845, N. gonorrhoeae В-7913 ГКПМ-Оболенск (аналог АТСС 43069), N. meningitidis В-
6621 ГКПМ-Оболенск (аналог АТСС 13077). АТСС — Американская коллекция типовых культур.
** Например, стандартный образец мутности бактериальных взвесей 10 ME (ОСО 42-25-59-85 П).
12