ГОСТ Р 70393—2022
7 Общие требования для микробиологических испытаний
7.1 Общие положения
Для проведения оценки качества серии/партии готовой питательной среды определяют параме
тры роста при помощи количественных или качественных методов.
Готовую среду инокулируют объемом рабочего разведения тест-штамма целевого микроорганиз
ма (для которого предназначена питательная среда) и нецелевого микроорганизма и визуально (или
под малым увеличением микроскопа) изучают характер его роста. Рост микроорганизмов оценивают с
помощью количественных (для плотных сред), полуколичественных или качественных методов.
Для оценки результатов качественным методом определяют наличие и характер роста каждого
из тест-штаммов. Рост целевых тест-штаммов должен быть типичным по цвету, размеру и морфологии
колоний; рост нецелевых тест-штаммов должен частично или полностью подавляться. Оценка резуль
татов в данном случае может быть выполнена с помощью шкалы роста, например, от 0 до 3 плюсов
(+).
Примечание — При оценке плотной среды цифра «0» соответствует отсутствию роста, «1+» — очень
слабому росту (менее 10 колоний), «2+» — наличию роста (раздельно расположенные колонии), «3+» — очень
выраженному росту (сливающиеся колонии). При оценке жидкой среды или полужидкой среды цифра «0» характе
ризует отсутствие мутности, «1+» — незначительную мутность и «2+» — значительную мутность.
Для оценки результатов количественным методом при интерпретации ингибирующих, накопитель
ных или задерживающих рост микроорганизмов свойств среды подсчитывают количество выросших
колоний на тестируемой и контрольной (среде без селективных добавок) средах и определяют ингиби
рующие, дифференцирующие, нейтрализующие и/или иные соответствующие назначению среды свой
ства. Требования к специфической активности зарегистрированных в установленном порядке бактери
ологических питательных сред и добавок перечислены в [2] (приложение 2). При выполнении работ с
микроорганизмами соблюдают требования безопасности в соответствии с [3].
7.2 Микробиологические показатели, характеризирующие специфическую активность и качество
питательных сред:
- чувствительность среды и стабильность основных биологических свойств микроорганизмов;
- скорость роста микроорганизмов;
-дифференцирующие свойства;
- ингибирующие свойства (или селективность);
- эффективность;
- стерильность;
- чистота розлива;
- сохранение жизнеспособности микроорганизмов в транспортных средах;
- чувствительность контрольных штаммов микроорганизмов к антимикробным препаратам.
Перечень показателей и их характеристики, необходимые для контроля основных групп питатель
ных сред, приведен в [3] (приложение 1).
7.2.1 Определение чувствительности среды и стабильности основных биологических
свойств микроорганизмов
Чувствительность среды определяют как максимальное разведение тест-штамма, обеспечиваю
щее визуально обнаруживаемый рост искомого микроорганизма в течение определенного времени и
при определенной температуре на всех засеянных чашках/пробирках с питательной средой (в соответ
ствии с инструкцией изготовителя).
7.2.2 Определение скорости роста микроорганизмов
Скорость роста в часах определяют по минимальному времени инкубации посевов, за которое
при соответствующем разведении (не менее 100 жизнеспособных клеток) обеспечивается отчетливый
видимый невооруженным глазом рост культуры (помутнение, наличие пленки, осадка, роста по уклону
и др.) во всех засеянных пробирках с жидкими (полужидкими) питательными средами или формирова
ние типичных, легко дифференцируемых колоний на чашках/пробирках с плотной средой.
7.2.3 Определение дифференцирующих свойств
Дифференцирующие свойства среды — выраженность отличительных признаков различных ми
кроорганизмов и естественных ассоциантов по структурным особенностям колоний, их окраске, изме
нению цвета и другим признакам. Дифференцирующие свойства определяют для питательных сред,
предназначенных для идентификации, выделения по следующим тестам:
10