ГОСТ ISO 21149—2013
3.4 исходная суспензия (initial suspension): Суспензия (или раствор) пробы в определенном объ
еме соответствующей жидкости (разбавитель, нейтрализатор, бульон или их сочетания).
3.5 разведение пробы (sample dilution): Разведение исходной суспензии.
4 Сущность метода
4.1 Общие положения
Данный метод касается подсчета колоний на неселективной агаризованной среде или опреде
ления наличия или отсутствия бактериального роста после обогащения. Вероятное ингибирование
микробного роста пробой должно быть нейтрализовано, чтобы можно было обнаружить все жизнеспо
собные микроорганизмы [1]. Во всех случаях и независимо от применяемой методики нейтрализация
антимикробных свойств продукции должна быть проверена и валидирована (2)—[4].
4.2 Подсчет микроорганизмов чашечным методом
Подсчет микроорганизмов чашечным методом состоит из следующих стадий:
- подготовка чашек Петри для культивирования определенного объема исходной суспензии или
разведений пробы в соответствующей питательной среде;
- инкубация чашек Петри в аэробных условиях при температуре (32.5 ± 2.5) °С в течение (72 ± 6) ч;
- подсчет числа колониеобразующих единиц (colony forming units) (КОЕ) и расчет количества ме-
зофильных аэробных микроорганизмов на кубический сантиметр или грамм продукции.
4.3 Мембранная фильтрация
Мембранная фильтрация состоит из следующих стадий:
- внесение соответствующего количества пробы, установленного путем валидации, в фильтроваль
ный аппарат, смоченный небольшим количеством соответствующего стерильного разбавителя, немед
ленное фильтрование и промывка в соответствии с валидированной методикой (см. 13.3.4). Затем
мем бранный фильтр переносится на поверхность определенной агаризованной среды согласно ISO
21148;
- инкубация мембранных фильтров в аэробных условиях при температуре (32,5 ± 2.5) °С в тече
ние (72 ± 6) ч;
- подсчет числа колониеобразующих единиц (КОЕ) и расчет количества мезофильных аэробных
микроорганизмов на кубический сантиметр или грамм продукции.
4.4 Обнаружение бактерий с предварительным обогащением
Обнаружение бактерий с предварительным обогащением состоит из следующих стадий:
- инкубация при температуре (32.5 ± 2.5) °С в течение не менее 20 ч определенного количества
исходной суспензии в неселективной жидкой среде, содержащей соответствующие нейтрализаторы
и/или диспергирующие агенты;
- перенос определенного количестваобогащенной суспензии на неселективнуюагаризоеанную среду;
- инкубация в аэробных условиях при температуре (32,5 ± 2.5) °С в течение 48-72 ч;
- учет выросших колоний и выражение результатов как «присутствие/отсутствие» мезофильных
аэробных микроорганизмов в определенной навеске S пробы продукции.
5 Разбавители, нейтрализаторы и питательные среды
5.1 Общие положения
Общие требования приведены в ISO 21148. Если в настоящем стандарте упоминается вода, то
это означает, что применяют дистиллированную или очищенную воду, как установлено в ISO 21148.
Следующие разбавители, нейтрализаторы и питательные среды пригодны для обнаружения и
подсчета мезофильных аэробных микроорганизмов. Допускается использовать другие разбавители,
нейтрализаторы и питательные среды, если была продемонстрирована их пригодность.
5.2 Разбавители и нейтрализующие разбавители
5.2.1 Общие положения
Разбавитель используется для диспергирования пробы. Он может содержать нейтрализаторы,
если тестируемая проба обладает антимикробными свойствами. Эффективность нейтрализации должна
2