ГОСТ ISO 21149—2013
9.4.2 Инкубация пробы
9.4.2.1 Общие положения
Инкубируют исходную суспензию, приготовленную в бульоне (5.4.3.2), при температуре
(32.5 ± 2.5) °С не менее 20 ч.
3.4.2.2 Субкультура
С помощью стерильной пипетки переносят 0.1-0.5 см3 инокулированной суспензии на поверх
ность чашки Петри (диаметром 85-100 мм), содержащей приблизительно 15- 20 см3соответствующей
агаризованной среды (5.4.2.1). Если используются большие чашки Петри, соответственно объем среды
на чашку возрастает.
9.4.2.3 Инкубация субкультуры
Не переворачивают инокулированную чашку Петри до тех пор, пока агаризованная среда в ней не
застынет, затем субкультуру инкубируют при температуре (32,5 ± 2.5) °С в течение 48-72 ч.
10 Подсчет колоний (чашечным методом и методом
мембранной фильтрации)
После инкубации подсчитывают колонии:
- на чашкахПетри, содержащихот30до 300 колоний; приподсчете менее чем 30 колоний см. 12.2.3;
- на мембранных фильтрах, содержащих от 15 до 150 колоний; при подсчете менее чем 15 коло
ний см. 12.2.3.
11 Обнаружение роста (с использованием обогащения)
После инкубирования субкультуры проверяют поверхностьагара и регистрируют присутствие или
отсутствие роста.
12 Обработка результатов
12.1 Определение количества микроорганизмов при посеве чашечным методом
Вычисляют число N микроорганизмов, присутствующих в пробе S. используя:
т — среднеарифметическое округленное число колоний из двух чашек Петри по формуле (1);
с_ — число колоний, подсчитанных на одной чашке по формуле (2). или
хс — среднее взвешенное число колоний, полученное из двух последовательных
разведений по формуле (3):
N = rrl{V ■d),
(D
N=ci(Vd),
(2)
N = xc(V d).
(3)
где т — среднеарифметическое число колоний, полученное из двух чашек Петри;
V — объем инокулята, внесенного в каждую чашку, см3;
d— коэффициент разведения, соответствующий разведению при приготовлении исходной су
спензии (9.2) или при первом подсчитанном разведении:
с— число колоний, подсчитанных на одной чашке;
хс — среднее число колоний, полученное из двух последовательных разведений и вычисленное
следующим образом:
- - 1С
*сп, +0.1л/
(4)
где £ с — сумма колоний, подсчитанных на всех чашках, выбранных для подсчета из двух последова
тельных разведений;
7