ГОСТ ISO 21148—2013
к изготовителю по поводу наиболее эффективного способа минимизации микробной контами
нации. Сильно контаминированная деионизированная вода, которая подверглась стерилиза
ционному фильтрованию, может к тому же содержать вещества, тормозящие рост некоторых
микроорганизмов.
Используют дистиллированную воду эквивалентного качества, то есть очищенную [2]. [9], [11] или
деионизированную воду [8]. Если дистиллированную воду приготавливают из хлорированной воды,
нейтрализуют хлор перед дистилляцией.
Вода должна храниться в посуде, изготовленной из инертных материалов (например, нейтраль
ного стекла, полиэтилена и т. д.).
8.3 Приготовление питательных сред
8.3.1 Общие положения
Существуют два типа приготовления питательных сред:
- из составных компонентов, обезвоженных или нет; или
- из готовых обезвоженных (сухих) сред.
В отношении условий хранения и сроков годности следуют рекомендациям изготовителя. Не ис
пользуют питательные среды с просроченным сроком годности.
Предохраняют лабораторные обезвоженные (сухие) питательные среды от поглощения дополни
тельной влаги из окружающей среды во время хранения и использования.
8.3.2 Регидратация
В отношении регидратации (растворения в воде) следуют рекомендациям изготовителя.
8.3.3 Измерение pH
Измеряют pH с помощью рН-метра (4.5) и регулируют его при необходимости таким образом, что
бы после стерилизации и охлаждения до комнатной температуры данная среда имела бы заданный
pH
±
0,2 ед pH. если не оговорено иное.
П р и м е ч ан и е — Доведение pH обычно проводят, используя раствор, состоящий приблизительно из
40 г/дм3 (около 1 моль/дм3) гидроокиси натрия (NaOH) или приблизительно из 36.5 г/дм3 (около 1 моль/дм3) со
ляной кислоты (HCI) [6].
8.3.4 Дозировка
Разливают среду в соответствующую лабораторную посуду вручную либо с помощью автомати
ческих приборов.
8.4 Стерилизация
8.4.1 Общие положения
Стерилизацию питательных сред и реактивов можно проводить следующими способами:
- паровая стерилизация;
- стерилизация фильтрованием.
В зависимости от используемого способа после стерилизации среду необходимо контролировать,
в особенности в отношении pH. цвета, стерильности и микробиологических характеристик.
8.4.2 Паровая стерилизация
Для стерилизации используют автоклав (4.6). Обычно стадия стерилизации занимает не менее
15 мин. при температуре 121 еС. При необходимости цикл стерилизации адаптируют в зависимости от
заданного объема, количества емкостей, характера загрузки и типа сред.
Эффективность процесса стерилизациидолжна быть подтверждена с помощью соответствующих
средств.
8.4.3 Стерилизация фильтрованием
Стерилизация посредством фильтрования может быть проведена в вакууме или в условиях вы
сокого давления.
Используют стерильные мембранные фильтры и фильтровальные элементы с диаметром пор
0.22 мкм (за исключением отдельных случаев, где может допускаться значение 0,45 мкм). Обращаются
к инструкциям изготовителя в отношении использования фильтровальных элементов или мембранных
фильтров, которые были приобретены в стерильном состоянии.
Стерилизуют различные компоненты фильтровального устройства в собранном или разобранном
состоянии в автоклаве в течение 15 мин. при температуре 121 °С. При необходимости может быть
7