ГОСТ Р 56139—2014
Засеянные чашки после застывания агара переворачивают вверх дном и помещают в термо
стат. Посевы инкубируют (72 ± 3) ч при температуре (30 ± 1) °С для определения бактерий рода
Lactococcus.
и (48 ± 3) ч при температуре (37 ± 1) °С для определения бактерий вида
Streptococcus
thermophilus.
При наличии в продукции одновременно бактерий рода
Lactococcus
и бактерий вида
Streptococcus thermophilus,
параллельно делают 2 посева, используя питательную среду М-17, pH ко
торой при посеве для определения бактерий рода
Lactococcus
должен быть установлен на уровне
(7.2 ± 0.1) ед. pH при температуре 25 ®С. а для определения бактерий вида
Streptococcus thermophilus —
на уровне (6.8 ± 0.1) ед. pH. Посевы инкубируют пять дней при температуре (20 ± 1) °С для опре
деления бактерий рода
Lactococcus,
и (48 ± 3) ч при температуре (45 ± 1) °С для определения
бакте рии вида
Streptococcus thermophilus.
После инкубирования посевы просматривают и отмечают рост колоний, характерных для бакте
рий рода
Lactococcus
и бактерий вида
Streptococcus thermophilus,
затем проводят подсчет выросших
колоний. Для подсчета колоний отбирают чашки Петри, на которых выросло от 10 до 300 характерных
колоний. Характеристика колоний приведена в приложении А.
Результаты оценивают визуально по каждой пробе отдельно.
Из выросших колоний готовят препараты, окрашивают по Граму по 9.2. наличие каталазы опре
деляют по 9.3. подвижность определяют по 9.4.
При наличии в препаратах специфичных по морфологии клеток (грамположительных неспоро-
образующих кокков, расположенных парами, короткими или длинными цепочками), отрицательном
тесте на каталазу, отрицательном тесте на подвижность колонии относят к
Lactococcus
или
Streptococcus thermophilus
и проводят обработку результатов по 10.
При необходимости отбирают культуры для дальнейшего изучения биохимическим методом по
9.5.
8.4.4 Бактерии рода
Propionibacterium
Для определения количества бактерий рода
Propionibacterium
из анализируемого пищевого про дукта
отбирают пробу по 7.3 и готовят необходимые разведения по 7.4. высевают глубинным мето
дом по 8.1.3 на питательные среды, указанные в 6.3.4.
Посевы для определения бактерий рода
Propionibacterium
инкубируют при температуре
(37 ± 1) °С в течение 24-48 ч с ограничением доступа кислорода, предварительный подсчет колоний
проводят через 24-27 ч.
Допускается при посеве на агаризованную питательную среду для определения бактерий рода
Propionibacterium
инкубировать посевы при температуре (30 ± 1) вС в течение 72 ч.
После инкубирования посевы просматривают и отмечают рост колоний, характерных для бакте
рий рода
Propionibacterium.
Характеристика колоний приведена в приложении А.
Из выросших колоний готовят препараты, окрашивают по Граму по 9.2. Наличие каталазы опре
деляют по 9.3. подвижность по 9.4.
Результаты оценивают визуально по каждой пробе отдельно. При наличии в посевах катала
зоположительных. неспорообразующих, грамположительных. неподвижных палочек, располагающих
ся поодиночке, парами, в виде букв
V
или
Y,
короткими цепочками или группами в виде «китайских
иероглифов», проводят обработку результатов по 10.
При необходимости отбирают культуры для дальнейшего изучения биохимическим методом по
9.5.
9 Методы идентификации пробиотических микроорганизмов
9.1В процессе идентификации определяются основные фенотипические признаки чистой куль
туры штамма: культуральные свойства колоний, морфология клеток в микроскопических препаратах,
отношение к окраске по Граму. способность к спорообразованию, а также каталазная активность при
использовании общепринятых в микробиологии методов анализа, для чего культуру микроорганизма
выделяют в чистом виде.
Чистую культуру штамма выделяют на питательной среде, предназначенной для данного вида
микроорганизма, позволяющей получать изолированные колонии. Культивирование изолятов бакте
рий рода
Lactobacillus
осуществляется на среде МРС (MRS), бактерий рода
Streptococcus
и
Lactococcus
— среде типа М-17 или среде Ли (Lee), бактерий рода
Bifidobacterium
— среде Блаурокка,
тиогликолевой. гцдролизатно-молочной, кукурузнолактозной. Бифидум среде, среде МРС (MRS) с
диклоксациллином. TOS-MUP-arape.
15