ГОСТ Р 56139—2014
теристика колоний приведена в приложении А. При посеве на стерильное молоко критерием роста
является сворачивание молока.
8.4.1.3 Из выросших колоний на чашках или из трех последних разведений с признаками роста
при посеве на полужидкую среду или стерильное молоко готовят препараты, окрашивают по Граму по
9.2. Наличие каталазы определяют по 9.3. подвижность по 9.4.
При обнаружении специфичных для бактерий рода
Lactobacillus
неспорообразующих, грампо-
ложительных. неподвижных, каталаэаотрицательных палочек, проводят подсчет числа или опреде
ление наиболее вероятного числа бактерий рода
Lactobacillus
по 10.
8.4.1.4 При необходимости для получения чистых культур из чашек и пробирок с признаками ро
ста производят пересев на агаризоваиную среду МРС (MRS) так. чтобы получить рост изолированных
колоний. Отбирают типичные колонии и пересевают их на среду МРС (MRS), инкубируют при темпе
ратуре (37 ± 1) °С с ограничением доступа кислорода, после чего подвергают дальнейшему изучению
по 9.5. При необходимости подтверждения принадлежности к роду
Lactobacillus
иУили дифференциа
ции видов используют методы идентификации микроорганизмов с помощью биохимических диагно
стических тест-панелей промышленного производства, обеспечивающих получение профиля фер
ментации расширенного набора углеводов и аминокислот не менее чем по 49 тестам.
8.4.2 Бактерии рода
Bifidobacterium
8.4.2.1 Для определения количества бактерий рода
Bifidobacterium
в анализируемом продукте
разведения, приготовленные согласно 7.4. высевают методом глубинного посева в пробирки с одной из
полужидких селективных питательных сред по 6.3.3.1 или в чашки Петри с одной из плотных се
лективных питательных сред no 6.3.3.2. Посевы инкубируют в анаэробных условиях при температуре
(37 ± 1) °С в течение 72 ч.
Предварительный учет результатов проводят через 24-48 ч инкубирования, окончательный
подсчет количества бактерий рода
Bifidobacterium
проводят через 72 ч культивирования.
Посевы просматривают и отмечают рост колоний, характерных для бактерий рода
Bifidobacterium,
затем проводят подсчет всех типов выросших колоний. Характеристика колоний би
фидобактерий и признаков роста на питательных средах приведена в приложении А.
Для подсчета колоний отбирают чашки Петри, на которых выросло от 15 до 150 характерных ко
лоний или пробирки с тремя конечными разведениями, в которых наблюдают характерный рост мик
роорганизмов. Для получения изолированных колоний производят пересев всех типов колоний, вы
росших на чашках Петри или в пробирках с полужидкими средами, в пробирки с неселективными сре
дами для культивирования по 6.3.3.3. разлитыми высоким столбиком или чашки с авизованными
средами для бифидобактерий, приготовленными без добавления селективных агентов.
Если в посевах первой генерации в пробирках и на чашках имеются четко изолированные коло
нии. допускается их отбирать для дальнейшего изучения без рассева.
В случае диффузного недифференцированного роста в пробирках с полужидкими средами до
пускается производить пересев 1 см3культуральной жидкости в пробирки с полужидкими или на чаш ки
с агаризованными селективными средами для бифидобактерий.
Посевы инкубируют в анаэробных условиях при 37 °С в течение 24-48 ч.
8.4.2.2 Подтверждение наличия бактерий рода
Bifidobacterium
методом микроскопироеания
По окончании инкубации отбирают все типы изолированных колоний (из пробирок — пастеров
ской пипеткой, с чашек — бактериологической петлей), имеющие морфологическое сходство с коло
ниями бактерий рода
Bifidobacterium
согласно приложению А.
Из выросших колоний готовят мазки-препараты, окрашивают по Граму, определяют наличие ка
талазы по 8.2.2. При обнаружении в препаратах клеток грамположительных палочек, неспорообразу
ющих. прямых, изогнутых или разветвленных. У- или У-образной формы, булавовидных: расположен
ных одиночно, цепочками, или скоплениями в виде «китайских иероглифов», и при отрицательном те сте
на каталазу колонии относят к бактериям рода
Bifidobacterium
и проводят обработку результатов по 10.
При необходимости проводят дальнейшую идентификацию культур биохимическим методом и
анализируют профиль ферментации углеводов и аминокислот по 9.4.
8.4.3 Бактерии рода Lactococcus и вида Streptococcus thermophilus
Для определения количества бактерий рода
Lactococcus
и бактерий вида
Streptococcus
thermophilus
из анализируемого продукта отбирают пробу по 7.3 и готовят необходимые разведения по
7.4. Разведения высевают поверхностным по 8.1.1 или глубинным методом по 8.1.2 на чашки с од
ной из агаризованных сред, указанных в 6.3.4.
14