ГОСТ Р 56139—2014
ра, фосфатнотиогликолевого буферного раствора или раствора лимоннокислого натрия по 1 см3
предыдущего разведения функционального пищевого продукта. Перемешивание предыдущего раз
ведения осуществляют путем осторожного промывания пипетки до 10 раз полученной смесью до
верхнего уровня имеющихся на ней делений, не допуская появления пузырьков и насыщения смеси
воздухом. Для приготовления каждого разведения берут новую стерильную пипетку.
7.4.6Разведения готовят с таким расчетом, чтобы последние из них не содержали пробиотиче
ских микроорганизмов. Для посева в (на) питательные среды выбирают разведения продукта, соглас
но таблице 1.
Т а б л и ц а 1
Н орм ируем ое количество пробиотических микроорганизм ов
Рекомендуем ое разведение для посева
10е
I f f 4, 1 0 s. 1 0 " . 1 0 ’, 1 0 "
ю ’1 0 \ 1 0 ". 1 01 0 ". 1 0 *
10а10 е, 1 0 т, 1 0 ". 1 0 а,1 0 ’°
1 0 “1 0 ’, 1 0 " . 1 0 В,1 0 Ш.Ю "
1 0 ’“
1 0 ", 1 0 и. 1 0 ’0, 1 0 ’ \ 1 0 ’ г
П р и м е ч а н и е— В случае ожидаемого большого количества пробиотических микроорганизмов в
функциональных пищевых продуктах допускается использовать для посева разведения продукта со степенью,
соответствующей нормируемому уровню их содержания, а также разведения на один порядок выше и ниже.
8 Проведение анализа
8.1 Поверхностный метод посева на плотные среды в чашках Петри
8.1.1 На подсушенную питательную среду наносят разведение продукта в количестве 0.2 см3 и
немедленно равномерно втирают посевной материал по всей поверхности с помощью стерильного
шпателя. Посев каждого разведения продукта проводят параллельно в две чашки Петри.
8.1.2 Засеянную поверхность подсушивают, выдерживая чашки в горизонтальном положении в
течение 15 мин. переворачивают вверх дном и помещают в термостат, установленный на соответ
ствующую температуру.
8.1.3 Для обеспечения оптимальных условий роста бактерий рода
Lactobacillus, Bifidobacterium,
Propionibacterium
на агаризованных средах осуществляют ограничение доступа кислорода одним из
указанных ниже методов:
а) посевы помещают в газовую среду, состоящую из 95 % газообразного азота и 5 % углекислого
газа;
б) посевы помещают в анаэробный сосуд (или изолирующий пластиковый пакет), в который за
кладывают газогенерирующие пакеты для химического связывания кислорода.
в) посевы помещают в анаэростат, аппарат закрывают, с помощью вакуумного насоса создают
вакуум 86.6—93,3 кПа:
г) на застывшую питательную среду в чашках Петри наливают второй слой расплавленной и
охлажденной до (45 ± 2) X агаризованной среды в количестве 5.0 см3 и оставляют до затвердения.
Учет полученных результатов должен производиться непосредственно после термостатирова-
ния. В других случаях, кроме особо оговоренных, чашки с посевами хранят не более 24 ч в холодиль
нике.
8.2 Глубинный метод посева в жидкие и полужидкие питательные среды в пробирках
8.2.1Используют три ряда пробирок, содержащих полужидкую питательную среду или стериль
ное обезжиренное молоко, для высева в них соответствующих разведений анализируемого функцио
нального пищевого продукта для определения количества пробиотических микроорганизмов по мето
ду наиболее вероятного числа (НВЧ). Перед проведением анализа среду, разлитую при приготовле-
12