ГОСТ 32427-2013
случае со сточными водами, оптимальный объем для использования в качестве посевной культуры
может определяться на основании дополнительных испытаний.
9.2.7 Предварительная подготовка посовной культуры
При необходимости, может быть проведена предварительная подготовка посевной культуры
путем аэрации воды из вторичных отстойников в течение 5 -7 дней при температуре эксперимента,
без использования дополнительных процедур или добавок.
9.2.8 Подготовка колб
9.2.8.1 Проводят активную аэрацию питательной среды в течение, как минимум. 20 мин и дают
раствору отстояться. В общем случае, среда готова к использованию после отстаивания через 20 ч
при температуре эксперимента. Проводят каждую серию испытаний с питательной средой,
полученной из одной и той же партии. Определяют концентрацию растворенного кислорода для
контроля. Концентрация должна составлять приблизительно 9 мг/л при 20 °С. Проводят все
манипуляции для заполнения флаконов полностью, до самого верха, избегая появления пузырей,
например, с помощью сифонов.
3.2.8.2 Готовят одновременно партии колб для ВПК для определения исследуемого и
референтного веществ в параллельных экспериментальных сериях. Одновременно готовят
необходимое количество колб для ВПК. включая содержащие посевную культуру, для проведения, по
крайней мере, двух дублирующих измерений потребления кислорода в желаемых временных
интервалах, например, после 0. 7, 14, 21 и 28 дней испытания. Для точного выявления 10-дневного
интервала может потребоваться большее число колб.
9.2.8.3 Добавляют полностью аэрированную питательную среду в большие колбы так. чтобы они
были заполнены приблизительно на 1/3. Затем добавляют достаточное количество растворов
исследуемого и референтного веществ (или добавляют вещество другим способом, (см. приложение Б)
для разбавления в большие колбы так. чтобы окончательная концентрация химических веществ не
превышала 10 мг/л. К холостой пробе в следующей большой колбе не добавляют никакие химические
вещества.
9.2.8.4 Для того, чтобы убедиться, что активность посевной культуры не снижена, концентрация
растворенного кислорода в колбах ВПК не должна быть ниже 0.5 мг/л. В общем случае, это
соответствует концентрации исследуемого вещества (примерно 2 мг/л). Значение большей
концентрации, которая может использоваться, может быть получено из ТПК исследуемого вещества
(мг Oj/мг химического вещества). Для веществ, плохо подвергающихся разложению, и веществ с
низким значением ТПК. может использоваться концентрация от 5 до 10 мг/л. В некоторых случаях
было бы желательно провести параллельную серию экспериментов с исследуемым веществом при
двух различных концентрациях, например. 2 и 5 мг/л. В обычном случае вычислите ТПК на основе
образования солей аммония, но. если известна или возможна нитрификация, поправки к изменениям
концентрации нитритов и нитратов вычисляют на основе образования нитрата ТПК*0з (см.
приложение В.2). Однако, если нитрификация не полная, но тем не менее происходит, внесите
поправку в концентрацию нитритов и нитратов, определенных в ходе анализов (см. приложение Г).
3.2.8.5 Если должна быть определена токсичность исследуемого вещества (в случае, например,
получения низких значений биоразлагаемости в предыдущих экспериментах), необходимо
использовать другую серию колб. Готовят другую большую колбу для содержания аэрированной
питательной среды (приблизительно 1/3 от объема колбы) плюс исследуемое и референтное
вещество в окончательной концентрации, обычно такой же. как и в других колбах.
9.2.8.6 Добавляют в растворы в больших колбах сточные воды из вторичных отстойников (одна
капля, или приблизительно 0,05 мл. до 5 мг/л. см 9.2.6.1) или посевную культуру из другого источника
такого, как речная вода (см. 9.2.6 2). Затем доводят растворы до необходимого объема аэрированной
питательной средой, используя шланг, достигающий основания колбы, для лучшего перемешивания.
9.2.8.7 Количество колб
При обычных условиях используются следующие колбы:
по крайней мере 10 колб, содержащих исследуемое вещество и посевную культуру
(экспериментальную суспензию);
по крайней мере 10 колб, содержащих только посевную культуру (холостой опыт);
по крайней мере 10 колб, содержащих стандартное вещество и посевную культуру
(контроль активности), и. при необходимости.
при необходимости 6 колб, содержащих исследуемое вещество, референтное вещество и
посевную культуру (контроль токсичности).
Для того, чтобы точно выявить 10-дневный интервал, необходимо примерно вдвое больше колб.
9.3 Процедура эксперимента
20