ГОСТ 32427—2013
Исследование слаборастворимых и нерастворимых веществ проводят по приложению Б. но в
методе MITI (метод С) не следует использовать ни органические растворители, ни эмульгаторы.
4.4 Посевная культура (инокулят)
Инокулят может быть получен из множества источников, в частности из активного ила. сточных
вод (нехлорированных). поверхностных вод и почвы или их смеси. Если в методах поглощения РОУ
(метод А), выделения С02 (метод В) и манометрического определения БПК (метод F) используется
активный ил, то он должен быть получен из очистных сооружений или в лабораторных условиях
из бытовых сточных вод. Посевная культура из других источников, обычно обладающая более
низкими значениями клеточной плотности, будет способствовать большому расхождению
результатов. Для модифицированного метода ОЭСР (метод Е) и метода испытания в «закрытом
сосуде- (метод D) требуется использование более разбавленной посевной культуры без
хлопьев. Наиболее приемлемым источником посевной культуры являются вторичные отстойники
очистных сооружений или культура, полученная в лаборатории. Для метода MITI (метод С) посевную
культуру получают из комбинированного источника. Характеристики источников и подготовка
посевной культуры описаны в соответствующем разделе отдельном для каждого метода.
4.5 Предварительная подготовка инокулята
Инокулят должен быть предварительно подготовлен к эксперименту, но не может быть
предварительно адаптирован к исследуемому веществу. Предварительная подготовка заключается в
аэрации (в питательной среде) активного ила или воды вторичных отстойников в течение 5 -7 дней
при температуре проведения испытания. В некоторых случаях предварительная подготовка
увеличивает точность методов испытаний, уменьшая количество холостых результатов. Подобная
подготовка не является необходимой для посевной культуры для метода MITI (метод С).
4.6 Абиотический контроль
При необходимости можно оценить способность исследуемого вещества к абиотическому
разложению путем определения поглощения РОУ. потребления кислорода или выделения диоксида
углерода в стерильных контрольных пробах, не содержащих посевной культуры. Стерилизация
осуществляется мембран-сифигыраи-тей (от02 до0,45мкм)
или
добавлением соответствующего токсичного
компонента необходимой концентрации. Если используется мембранная фильтрация, забор образцов
осуществляется асептически для обеспечения стерильности. За исключением случаев, когда
адсорбция исследуемого вещества была заранее исключена, испытания на биоразложение, такие как
поглощение РОУ, особенно с использованием инокулята из активного ила. должны включать
абиотический контроль с инокулятом и токсичным компонентом.
4.7 Количество колб и образцов
4.7.1 Необходимо использовать как минимум две колбы или емкости, содержащие исследуемое
вещество и посевную культуру и. как минимум, две емкости, содержащие только посевную культуру.
Одной емкости достаточно для проведения испытания с референтным веществом и инокулятом, а
также, при необходимости, для исследования токсичности, абиотического разложения и контроля
адсорбции. Для методов испытания а «закрытом сосуде- (метод D) и MITI (метод С) существуют
специальные требования к количеству экспериментальных емкостей. Данные требования указаны в
соответствующих разделах для каждого метода. Измерение РОУ и/или других характеристик для
экспериментальной и контрольной емкостей необходимо проводить параллельно. Желательно
измерения РОУ в других флаконах проводить в нескольких параллелях, однако это не всегда
возможно.
4.7.2 Необходимо представить достаточное количество образцов и данных для оценки процента
разложения в 10-дневном интервале, однако точный момент наступления лаг-фазы определить
невозможно из-за широкого диапазона лаг-фаз и скоростей разложения вещества. В методе MITI
(метод С) и при использовании автоматического респирометра в манометрическом методе
определения БПК (метод F), забор проб на потребление кислорода не представляет затруднений. В
последнем методе ежедневный отбор данных является достаточным, если не используется
автоматический респирометр. Специальные указания по отбору проб приведены в соответствующем
разделе отдельно для каждого метода.
5 Данные и отчет о проведении эксперимента
5.1 Обработка результатов
5.1.1 При вычислении процента биоразложения О... используют средние значения повторных
измерений одного и того же параметра в экспериментальных емкостях и в контроле с посевной
культурой. Формулы для вычисления приведены в соответствующем разделе отдельно для каждого
метода. Процесс деградации представляется графически, и, при необходимости, на графике
обозначается 10-дневный интервал. Необходимо вычислить и указать в отчете достигнутое
разложение в процентах и величину плато или в конце эксперимента и/или в конце 10-дневного
7