ГОСТ 32427-2013
концентрированной соляной кислоты HCI или 0,4 г этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА
динатриевая соль) на 1л.
Если в растворах образуются осадки, необходимо заменить их свежими растворами.
6.2.4 Приготовление питательной среды
10мл раствора (а) смешивают с 800 мл воды, затем добавляют 1 мл растворов (Ь), (с) и (d) и
доводят объем до 1 л.
6.2.5 Приготовление раствора тестируемых веществ
Если растворимость вещества превышает 1 г/л, то в небольшом количестве воды растворяют
соответственно от 1 до 10 г исследуемого или референтного вещества и доводят объем до 1 л. В
ином случае, готовят основные растворы в питательной среде или добавляют химическое вещество
непосредственнокпитательнойсреде,предварительноудостоверившись,чтовещество
растворилось.
6.2.6 Инокулят
Инокулят может быть получен из различных источников: активного ила. сточных вод.
поверхностных вод. почв, или их смеси.
6.2.7 Инокулят из активного ила
6.2.7.1 Отбирают свежий образец активного ила из аэротенка очистных сооружений или из
лабораторной установки переработки бытовых сточных вод. При необходимости отфильтровывают
крупные частицы через мелкое сито, затем выдерживают раствор в аэробных условиях.
6.2.7.2 Другим способом активный ил. после удалениякрупных частиц, отстаивают или
центрифугируют (например. 1100 g в течение 10 минут). Удаляют надосадочную жидкость. Осадок
промывают в питательной среде. Смешивают концентрированный ил с питательной средой, для
получения концентрации от 3 до 5 г сухого веса на 1л. Затем аэрируют.
6.2.7.3 Ил необходимо забирать с очистных сооружений, работающих в нормальном режиме.
Если ил взят с крупнотоннажных очистных сооружений, или предполагается, что он содержит
ингибиторы, его необходимо промыть. Повторно взвешенный ил после тщательного перемешивания
отстаивают или центрифугируют, удаляют супернатант и снова повторно готовят суспензию
промытого ила в дополнительном объеме питательной среды. Эту процедуру повторяют до тех
пор. пока ил не будет очищен от взвешенных веществ или ингибиторов.
6.2.7.4 После приготовления суспензии активного ила. или из необработанного ила.
непосредственно перед использованием определяют величину сухого остатка.
6.2.7.5 В дальнейшем можно гомогенизировать активный ил (от 3 до 5 г сухого веса 1 л).
Обработку активного ила проводят в гомогенизаторе Уоринга в течение 2 минут на средней скорости.
Гомогенизированный ил отстаивают в течение минимум 30 минут, или при необходимости дольше, и
декантируют жидкость для использования в качестве посевного материала с концентрацией
примерно 10 мл/л питательной среды.
6.2.8 Прочие источники посевной культуры
6.2.8.1 Другим способом инокулят может быть получен из вторичных отстойников очистных
сооружений или лабораторной установки по переработке бытовых сточных вод. Отбирают свежий
образец и сохраняют его в аэробных условиях во время транспортировки. Образец отстаивают в
течение 1 часа или фильтруют его через грубую фильтровальную бумагу, отфильтрованные сточные
воды или фильтрат выдерживают в аэробных условиях в течение необходимого времени. До 100 мл
подобной посевной культуры может использоваться на 1 л питательной среды.
6.2.8.2 Еще одним источником посевной культуры могут служить природные поверхностные
воды. В данном случае, забирают образец соответствующих поверхностных вод. например, вод реки,
озера, и сохраняют в аэробных условиях в течение необходимого времени. При необходимости,
проводят концентрирование посевной культуры фильтрацией или центрифугированием.
6.2.9 Предварительная подготовка инокулята
Инокулят должен быть предварительно подготовлен к условиям проведения эксперимента, но
не может быть заранее адаптирован к тестируемому веществу. Предварительная подготовка
заключается в аэрации активного ила (в питательной среде) или воды из вторичных отстойников в
течение 5 - 7 дней при температуре проведения исследования. Предварительное создание условий
иногда улучшает точность метода испытаний, уменьшая количество холостых значений.
6.2.10 Подготовка колб
6.2.10.1В качестве образца: добавьте по 800 мл питательной среды в двухлитровые конические
колбы и достаточное количество основных растворов исследуемого и референтного веществ в
отдельные колбы так, чтобы концентрация химического эквивалента составляла от 10 до 40 мг
РОУ/л. Измерьте значения pH и, при необходимости, доведите его до 7.4. Добавьте в колбы активный
ил или другой источник посевной культуры, чтобы финальная концентрация не превышала 30 мг по
10