ГОСТ 32427-2013
7.2.8.3 При необходимости используют одну колбу для исследования возможных ингибирующих
эффектов исследуемого вещества, добавив исследуемое и референтное вещества в тех же
концентрациях, в которых они присутствуют в остальных колбах.
7.2.8.4 Также, при необходимости, определяют, подвергается ли исследуемое вещество
разложению в абиотических условиях с использованием стерилизованного неинокулированного
раствора химического вещества. Стерилизацию можно провести, добавив токсичное вещество в
соответствующей концентрации.
7.2.8.5 Если используется раствор гидроксида бария, соединяют три поглотителя, содержащие
100 мл 0.0125 М раствора гидроксида бария каждый, последовательно с каждой 5 литровой колбой.
Данный раствор не должен содержать осажденных сульфатов или карбонатов, их
концентрация должна быть измерена непосредственно перед использованием. Если
используется гидроксид натрия, то необходимо соединить два поглотительных сосуда, второй
используется в качестве контрольного для подтверждения того, что весь углекислый газ
был поглощен первым. Поглотительные сосуды, оснащенные пробкой, подходят для проведения
эксперимента. Добавляют 200 мл 0,05 М раствора гидроксида натрия в каждую колбу. Этого
достаточно для того, чтобы обеспечить поглощение всего диоксида углерода,
выделяющегося при полном разложении исследуемого вещества. Поскольку даже
свежеприготовленный раствор гидроксида натрия будет содержать следовые количества
карбонатов, необходимо делать поправку на них в контрольном эксперименте.
7.2.8.6 Дополнительно могут быть отобраны пробы для анализа РОУ (см. приложение В) и / или
определенного химического анализа.
7.2.9 Количество колб
В общем случае, используются следующие колбы:
-колбы 1 и 2. содержащие исследуемое вещество и посевную культуру (тестовая суспензия);
-колбы 3 и 4, содержащие только инокулянт (нулевой контроль);
-колба5.содержащаяреферентноевещество ипосевнуюкультуру(контроль
экспериментальных процедур); и. предпочтительно, а также
-колба 6. содержащая исследуемое вещество и стерилизующий агент (абиотический
стерильный контроль);
-колба 7, содержащая исследуемое вещество, посевную культуру и стерилизующий агент
(контроль адсорбции);
-колба 8. содержащая исследуемое вещество, референтное вещество и посевную культуру
(контроль токсичности).
7.3 Процедура эксперимента
Начинают эксперимент, пропуская воздух, не содержащий С02, через суспензию со скоростью
от 30 до 100 мл/мин.
7.3.1 Определение С02
7.3.1.1 Обязательно регистрировать выделение СОг в исследуемых суспензиях и контрольных
экспериментах с посевной культурой параллельно и. желательно, проводить параллельные
измерения и для прочих экспериментальных сосудов.
7.3.1.2 В течение первых 10 дней рекомендуется, чтобы анализ С02проводился каждый 2 или 3
день, а затем, по крайней мере, каждый 5 день до 28 дня так. чтобы мог быть выявлен 10-дневный
интервал. В те дни. когда проводятся измерения С02, разъединяют ближайший к экспериментальной
колбе поглотитель гидроксида бария и титруют раствор гидроксида 0,05 М раствором HCI с
использованием фенолфталеина в качестве индикатора. Оставшиеся абсорберы перемещают на
одно место ближе к испытательному сосуду и помещают новый абсорбер, содержащий 100 мл
свежего 0,0125 М раствора гидроксида бария, в конце ряда. При необходимости, титрование
проводят, например, когда наблюдается существенное осаждение в первой ловушке и прежде, чем
оно появится во второй, или, по меньшей мере, еженедельно. В альтернативном варианте, с
использованием в качестве абсорбента гидроксида натрия (NaOH), пробу раствора гидроксида
натрия забирают из абсорбера, ближайшего к экспериментальной колбе с помощью шприца.
Необходимый объем пробы будет зависеть от используемого метода анализа углерода, но проба не
должна значительно изменять объема абсорбционного раствора в течение эксперимента. Введите
образец в часть неорганического углерода в углеродном анализаторе для прямого анализа
выделяемого углекислого газа. Анализ содержимого второй ловушки необходимо проводить только по
окончании эксперимента для корректировки с учетом возможного выноса диоксида углерода.
7.3.1.3 На 28 день исследования отбирают произвольные пробы для анализа РОУ и/или
специфического химического анализа. Добавляют1 мл концентрированной соляной кислоты в
каждую экспериментальную колбу и проводят аэрацию содержимого в течение ночи для удаления
14