ГОСТ 32427-2013
сухому остатку/л. Также подготовьте контрольные пробы с посевной культурой в минеральной среде,
но без добавления исследуемого или стандартного веществ.
6.2.10.2 При необходимости используют одну емкость для проверки возможной ингибирующей
активности исследуемого вещества, внося имокулянт. содержащий сопоставимые концентрации
исследуемого и референтного веществ в питательной среде.
6.2.10.3 Кроме того, если требуется, определите деградацию в абиотических условиях путем
отстаивания исследуемого вещества в колбе простерилизованного неинокулированного раствора
вещества. Стерилизация раствора проводится мембранной фильтрацией (от 0,2 до 0.45 мкм) или
добавлением подходящего токсичного вещества в соответствующей концентрации.
6.2.10.4Дополнительно,еслиожидается,чтоисследуемоевеществозначительно
адсорбируется на стекле, иле и т.д.. проводят предварительную оценку для определения вероятной
степени адсорбции и. таким образом, пригодности метода для данного вещества (см. таблицу 1).
Готовят колбу, содержащую исследуемое вещество, посевную культуру и стерилизующий агент.
6.2.10.5 Доводят объемы питательной среды во всех колбах до 1 литра и, после
перемешивания, отбирают образец из каждой колбы для определения начальной концентрации РОУ в
параллельных экспериментах (см. приложение В, пункт В.4). Закрывают горлышко колб (например,
алюминиевой фольгой) таким образом, чтобы обеспечить свободный воздухообмен между колбой и
окружающей атмосферой. Для начала эксперимента устанавливают емкости в аппарате для
встряхивания.
6.2.11 Количество колб
В обычном случае используются следующие колбы:
-колбы 1 и 2. содержащие исследуемое вещество и посевную культуру (экспериментальная
суспензия):
-колбы 3 и 4, содержащие только посевную культуру (контрольный эксперимент с посевной
культурой);
-колба5.содержащаяреферентноевеществои посевнуюкультуру (контроль
экспериментальных процедур): и. предпочтительно.
а также, при необходимости
-колба 6. содержащая исследуемое вещество и стерилизующий агент (абиотический
стерильный контрольный эксперимент):
-колба 7. содержащая исследуемое вещество, посевную культуру и стерилизующий агент
(контроль адсорбции);
-колба 8. содержащая исследуемое вещество, стандартное вещество и посевную культуру
(контроль токсичности).
6.3 Процедура эксперимента
6.3.1 Определение растворенного органического углерода
В течение эксперимента определяют концентрацию РОУ в образцах из каждой колбы в
параллельных экспериментах в определенных временных интервалах. Обязательно параллельное
определение РОУ в экспериментальной суспензии и в контрольном эксперименте с посевной
культурой. Желательно определять РОУ и в других колбах также параллельно, однако это не всегда
возможно.
6.3.2 Отбор проб
Для каждого определения берут только минимально необходимый объем экспериментальной
суспензии. Прежде, чем осуществлять отбор проб, необходимо устранить любые потери вследствие
испарения путем добавления соответствующего количества воды. Тщательно перемешивают
питательную среду до отбора образца так. чтобы материал, адсорбированный на стенках емкости,
был смыт и растворен до отбора пробы. Сразу после отбора пробы ее фильтруют через мембранный
фильтр или центрифугируют (см. приложение В, пункт В.4). Анализ пробы, отфильтрованной или
обработанной в центрифуге, проводят в тот же день, в ином случае, хранят при температуре от 2<С
до 4°С в течение максимум 48 ч или при температуре ниже минус 18 в течение более
длительного периода.
6.3.3 Частота отбора проб
Отобранное количество проб должно быть достаточным для оценки процента деградации в 10 -
дневный периоде. Точной схемы отбора проб не существует. Если анализ производится в день
отбора проб, исходя из результатов данного анализа, необходимо оценить следующее время отбора
пробы. Если пробы сохраняются, то отбор проб производится ежедневно или раз в 2 дня. Сначала
необходимо провести анализ последней пробы (28 день) и, путем постепенного обратного отбора
соответствующих образцов для анализа, можно получить качественное описание кривой
биологического распада с относительно небольшим количеством определений. Конечно, если в
11