ГОСТ 32149—2013
бактериологической петлей отсевают в чашки Петрис питательным или мясо-пептонным агаром. Посе
вы инкубируют при температуре (37 ± 1)°С в течение 18—24 ч.
Из выросших наагаре колоний, предположительно относящихся к St. aureus, после проверки маз
ков на чистоту культуры под микроскопом ставят реакцию плазмокоагуляции. Для этого вдве пробирки
помещают по 0.5 см3 разведенной кроличьей плазмы. В одну пробирку вносят петлей исследуемую
суточную агаровую культуру, другую пробирку оставляют незасеянной. Пробирки помещают в термос
тат при температуре (37 ± 1) °С. Учет результатов проводятчерез 2—4 ч и пробирки оставляютдо
утра при комнатной температуре для окончательного учета. Пробирки следует просматривать
осторожно, чтобы не разрушитьобразовавшийся сгусток.
При учете реакции плазмокоагуляции могут наблюдаться три степени активности фермента коа-
гулазы:
+++♦ — сгусток плотный, при наклоне пробирки неподвижен;
+♦+ — сгусток, имеющий небольшой отсек, при наклоне пробирки подвижен, плотная коагуляция
плазмы;
+♦ — сгусток в виде взвешенного мешочка, неполная коагуляция плазмы собразованием подвиж
ногосгустка в центре плазмы.
Все три варианта являются положительным результатом. Колонии, предположительно относя
щиеся к St. aureus, выросшие на желточно-солевом агаре, бактериологической петлей пересевают в
чашки Петри, содержащиеагаризованнуюсредус маннитом (или мальтозой) ииндикатором феноловым
красным. Посевы термостатируют при температуре (37
а
1) X в течение (24 ± 1)ч. При положительной
реакции вокруг колонии наблюдается желтое окрашивание среды, четко контрастирующее с пурпур но-
красным фоном.
11.3 Для выявления ибиохимической идентификации St. aureusдопускается использование ком
мерческих тест-систем, допущенных к применению на территории государства, принявшего стандарт,
которые представляют собой набор одноразового использования в виде планшета со стрипами. надно
лунок которых нанесены соответствующие субстраты с индикаторами. Проведение анализа и учет
результатов проводят по инструкции производителя.
11.4 Обработка результатов
11.4.1 Результаты оценивают по каждой пробеотдельно.
Наличие грамположительныхгроздевиднорасположенных мелких кокков вмазкахизхарактерных
колоний на желточно-солевом агаре, положительная реакция плазмокоагуляции, ферментация манни та
и мальтозы с образованием кислоты свидетельствуюто выявлении в 1см3(г) продуктов St. aureus.
Результатзаписывают как «не обнаружены» или «обнаружены» St. aureus в 1см3(г) продукта.
11.4.2 Допускается для целей экспрессного выявления St. aureus и/или подтверждения принад
лежности выделенных культурк St. aureusиспользование подложекили пластинв виде подготовленной
тест-системы, содержащей наборпитательныхвеществ, герметичнозакрытых непроницаемой мембра
ной; иммунохроматографических экспресс-тестов; бактериологических анализаторов, например на
принципе импеданса; метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) по [1]. Проведение анализа и учет
результатов с использованием таких методов проводят по инструкциям к прибору.
15