ГОСТ Р ИСО 17735—2012
При проведении анализа, если не установлено иное, следует использоватьтолько хроматографи
ческичистые реагенты ихроматографически чистую воду.
4.1 МАР-роагонт
Приготовление MAP-реагента основано на реакции 9-(хлорметил)антрацена с пиперазином (см.
рисунок2).
1 — 9-(хлормстил)антрацен: 2 — пиперазин; 3 — МАР
Рисунок 2 — Схема получения МАР
При проведении следующих процедур используют хроматографически чистые растворители.
Растворяют 10.8 ммоль(2.47 г)9-(хлорметил)антрацена (смассовойдолейосновного вещества не
менее 98 %) в 25 мл метиленхлорида. Переносят полученный раствор вделительную воронку.
Растворяют 54,4 ммоль (4.69 г) пиперазина (с массовой долей основного вещества 99 %) и
21.8 ммоль (3.04 мл)триэтиламина (с массовой долей основного вещества 99.5 %) в 37 мл метиленхло
рида. Переносят полученный раствор в круглодонную двугорлую колбу вместимостью 250 мл с магнит
ной мешалкой.
При перемешивании добавляют к этому раствору раствор 9-(хлор-метил)антрацена по каплям в
течение 30 мин. Промывают делительную воронку метиленхлоридом объемом 10 мл. Оставляют реак-
ционнуюсмесь при постоянном перемешивании, покрайней мере, надва часа для протеканияреакции.
Промывают реакционную смесь вделительной воронке три раза 130 мл воды, энергично встряхи
вая ее в течение 1мин. Отделяютэмульсию, образовавшуюся послепервогопромывания, содержащую
в основном примеси, а не МАР. Удаляютпромывные воды.
Переносят промытый раствор МАР в предварительно взвешенную круглодонную колбу. Дают
метиленхлориду испариться поддействием непрерывного потока азота. Взвешивают колбу с остатком
для приблизительного вычисления выхода продукта. Полученный неочищенный МАР можно безопасно
хранить в морозильной камере до проведения дальнейшей очистки.
МАР очищают с применением колоночной хроматографии и последующей сублимацией. В стек
ляннуюхроматографическую колонку внутренним диаметром приблизительно50 мм переносят суспен
зию силикагеля в толуоле так, чтобы толщина слоя силикагеля в колонке составила приблизительно 80
мм. Промывают стенки колонки толуолом и дают емудаже достичь поверхностисиликагеля.
Растворяютнеочищенный МАРв 80 мл толуола. Обрабатывают полученнуюсмесьультразвуком в
течение5 мин ифильтруютчерез фильтровальную бумагу. Сохраняютфильтрат. Растворяютосадок на
фильтре в 20 мл толуола, обрабатывают в течение 5 мин ультразвуком и снова фильтруют через
фильтровальнуюбумагу. Утилизируютфильтр с осадком. Объединяютфильтраты и осторожно перено
сят их в хроматографическую колонкуповерхслоя силикагеля. Пропускаютчерез колонкудополнитель
ный объем толуола. Удаляюттолуоловыйэлюат.
Начинают элюирование этилацетатом. Собирают порции элюата объемом 20 мл в одноразовые
виалы с крышками, футерованными политетрафторэтиленом (ПТФЭ). Контролируют порции элюата
путем нанесения пробы каждой из них объемом 1мкл напластинку (см. ниже) тонкослойнойхроматогра-
фиии (ТСХ)и наблюдаютза интенсивностью пятна вультрафиолетовом свете после испарения раство
рителя. Эта процедура обеспечивает обнаружение в элюенте МАР или других соединений. Проводят
элюирование этилацетатом до исчезновенияжелтой окраски, для чего необходимооколо400 млэтил-
з