ГОСТ 31719—2012
- смесь праймеров (олигонуклеотидов) для амплификации определяемых нуклеотидных последо
вательностей генома крупного рогатого скота:
F S’ ТGAGGАСАААТАТСАТТСТGAGG 3’,
R 5’ GAGCAAGAATTAGGATAGAGAAG 3’
или генома свиньи:
F S’ GACCTСССAGCTCCАТСАААСАТСТCAT CAT GAT GAAA 3’.
R 51GCTGATAGTAGATTTGTGATGACCGTA 3’
или генома курицы:
F S’ TCACATCGGACGAGGCCTA 3’,
R 51’GGAATGGGGTGAGTATGAGAGTT 3’’
или генома сои:
F S’ GTGCTACTGACCAGCAAGGCAAACTCAGCA 3’.
R 5’ GAG GGTTTTGGGGTGCCGTTTTCGTСAAC 3’
или генома картофеля.
F S’ GAT GGTGCTGTTGCTACTGTTGAT GAT CC 31,
R 5’ AACATCCATCGTGCAGTACCCCATTTAGC 31
или генома кукурузы:
F S’ TTCTCGTCGTGTGCCTGGCTCTGTCAG 3’.
R 5’ CGTCCATCATCCTCATCT GCTGCTGCTGGC 3’:
- контрольный образец (далее K+). содержащий ДНК выявляемого вида животного (крупного рога
того скота, свиньи, курицы) или растения (сои. кукурузы, картофеля).
4.34.4 Наборы реагентов для ПЦР в реальном времени1*:
- пробирки амплификационные с лиофильно высушенной амплификационной смесью состава по
4.34.3 для проведения ПЦР в режиме реального времени;
- ПЦР — растворитель, содержащий фоновый краситель ROX;
- смесь праймеров (олигонуклеотидов) для амплификации определяемых нуклеотидных последо
вательностей генома крупного рогатого скота:
F 5’ GCCTTСТСТАТССТААТТCTTGCTСТААТС 3’,
R 51’AATAG GTCT GCTACTAGGGCTСAG ААТА 3’
или генома свиньи:
F 5’ GGCTTTTCCGTCGACAAAGC 3’.
R 5’ СТGCGAGGGCGGTAATGAT 3>;
- контрольный образец (далее К+). содержащий ДНК выявляемого вида животного (крупного рога
того скота, свиньи).
4.35Набор реагентов для детекции продуктов амплификации методом электрофореза в агароз
ном геле:
- буфер для электрофореза (трис-ЭДТА-боратный буфер, сухая смесь);
- агароза для электрофореза:
- бромистый этидий. х. ч.
5 Отбор проб, их транспортирование и хранение,
подготовка к анализу
Метод определения сырьевого состава основан на выявлении при помощи ПЦР фрагментов ви
доспецифичной ДНК. присутствие которых в анализируемом материале однозначно свидетельствует о
наличии в нем компононтов тканей растений или животных определенного вида.
5.1 Отбор проб
Отбор проб проводят по государственным стандартам, устанавливающим порядок отбора проб
для однородных групп пищевой продукции и кормов — ГОСТ 7631. ГОСТ 9792. ГОСТ 10852. ГОСТ 12430,
ГОСТ 13341. ГОСТ 26312.1. ГОСТ 26313, ГОСТ 27668.
11 Применяют при проведении этапа амплификации по методике, описанной в подразделе 7.4.
5