ГОСТ 31719—2012
Приложение Б
(рекомендуемое)
Интерпретация результатов качественного определения фрагментов видоспецифичной ДНК
Б.1 Использование метода электрофореза для детекции продуктов амплификации
В продуктах амплификации положительного контроля наборов для определения фрагментов видоспецифич
ной ДНК должна присутствовать одна яркая и четкая полоса — специфический фрагмент (см. рисунки Б.1 и Б.2).
Размеры специфических фрагментов указаны в таблице Б.1.
В пробирке с К- любого из наборов для ПЦР не должны присутствовать как специфические, так и неспецифи
ческие фрагменты. Допускается присутствие неиспользованных в ходе ПЦР праймеров в виде слабо окрашенной
нечеткой полосы размером менее 50 нуклеотидных пар (н.п.).
Положительными, то есть содержащими искомый фрагмент ДНК. считаются пробы, содержащие светящиеся
полосы, расположенные на таком же расстоянии от точки старта, что и полоса соответствующего К+.
В случаях, когда в ходе детекции фрагмента ДНК какого-либо образца получен неоднозначный результат,
для уточнения результата необходимо повторное проведение амплификации с анализируемым экстрактом ДНК.
Если удовлетворительный результат не достигнут таким способом, требуется повторное выделение ДНК из новой
пробы исследуемого материала и дополнительная постановка ПЦР.
М 1 2 3
400
3 0 0
200
100
М - маркер молекулярных масс; 1—3 — специфические фрагменты, являющиеся продуктами амплификации К+:
1
-
«LEC-ПЦР ядро» <164 и.п.).
2
— «ZEX-ПЦР ядро* (273 н.п ).
3
- .РЛТЕХ-ПЦР ядро* (300 н.п.)
Рисунок Б.1 — Эпектрофореграмма фрагментов видоспецифичной ДНК сои. кукурузы и картофеля,
полученных при использовании наборов серии «ПЦР ядро»
16