ГОСТ 31719—2012
Приложение А
(обязательное)
Меры предосторожности при работе в ПЦР-лаборатории
Для исключения ложноположительных результатов исследования и неправильной интерпретации получен
ных данных, а также чтобы предотвратить неконтролируемое распространение амплифицированных фрагментов,
при работе в лаборатории необходимо соблюдать следующие требования.
А.1 ПЦР-лаборатория должна включать следующий набор рабочих зон:
- зона приема и регистрации:
- зона первичной обработки материала:
- зона выделения ДНК;
- зона проведения ПЦР;
- зона детекции продуктов амплификации (отсутствует в случае, если детекция продуктов ПЦР осуществля
ется по методике ПЦР в реальном времени).
А.1.1 Зона приема и регистрации предназначена для регистрации и хранения поступающего материала.
А.1.2 Зона первичной обработки материала предназначена для сортировки и маркировки образцов, обработ
ки лизирующим буфером, а также первичной инактивации остатков биоматериала.
А.1.3 Зона выделения ДНК предназначена для экстракции ДНК из исследуемого материала, прошедшего
первичную обработку в зоне приема и первичной обработки образцов, а также временного хранения проб выде
ленной ДНК.
А.1.4 Зона проведения ПЦР предназначена для внесения ДНК в реакционную смесь для ПЦР и проведения
амплификации. В этой зоне запрещается проводить все другие виды работ с образцами ДНК. растительным мате
риалом. микробиологические и другие виды исследований.
А.1.5 Зона детекции продуктов амплификации предназначена для анализа продуктов ПЦР методом электро
фореза. Зона детекции должна быть изолирована в отдельном помещении с тамбуромдля смены рабочей одежды и
УФ-боксом для проведения электрофореза.
А.2 В ПЦР-лаборатории должны быть предусмотрены вспомогательные помещения [гардероб, кабинет за
ведующего лабораторией, комната приема пищи, подсобные (складские) помещения, туалет). Вспомогательные
помещения могут быть общими с другими подразделениями учреждения.
А.З Планировочные решения и размещение оборудования должны обеспечивать поточность движения ис
следуемого материала. Следует полностью исключить воздухообмен между зоной детекции продуктов амплифи
кации и другими зонами.
А.4 Лаборатория должна быть оборудована водопроводом, канализацией, электричеством, отоплением
и приточно-вытяжной или вытяжной вентиляцией. Все помещения лаборатории обеспечиваются достаточным
естественным и искусственным освещением. При необходимости в ПЦР-лаборатории могут быть установлены
кондиционеры.
А.5 Поверхности стен, пола и потолка в лабораторных помещениях должны быть гладкими, без щелей, легко
обрабатываемыми, устойчивыми к действию моющих и дезинфицирующих средств. Полы не должны быть скольз
кими. Лабораторная мебель должна иметь покрытие, устойчивое кдействию моющих идезинфицирующих средств.
Поверхность столов не должна иметь трещин и швов.
А.6 Помещения на всех этапах ПЦР-анапиза должны быть оборудованы бактерицидными пампами в соот
ветствии с документами, действующими на территории государства, принявшего стандарт.
А.7 Помещения лаборатории должны быть непроницаемы для грызунов и насекомых.
А.8 ПЦР-лабораторию обеспечивают средствами пожаротушения.
А.9 Каждую зону ПЦР-лаборатории оснащают индивидуальным набором соответствующего лабораторного
оборудования, расходных материалов и рабочей одежды, используемых только в данной зоне. Комплект лабора
торного оборудования определяют с учетом используемых методик проведения ПЦР-анализа, наборов реагентов
для выделения нуклеиновых кислот, амплификации и детекции результатов исследований.
А.9.1 Приборы, оборудование и средства измерения, используемые в ПЦР-лаборатории. должны быть тех
нически исправны, иметь паспорт и инструкцию по эксплуатации. Средства измерения регулярно подвергают ме
трологическому контролю. Используемые приборы должны соответствовать нормам безопасности и электромаг
нитной совместимости.
А.9.2 Для проведения исследования используют приборы и расходные материалы (микропробирки, наконеч
ники к автоматическим дозаторам), исключающие возможность перекрестной контаминации (загрязнения выявля
емой ДНК) исходного материала, экстрактов ДНК. Для этого используют.
- термостаты с твердотельным термоблоком:
- пробирки с плотно закрывающимися крышками:
14