ГОСТ РИСО 14729—2010
Приложение Е
(справочное)
Искусственные слезы (органический грунт), получаемые при проведении
лабораторных испытаний
Для оценки средств дезинфекции контактных линз искусственная слеза не требуется, но ее можно использо
вать; в настоящем приложении искусственная слеза обсуждается в контексте применения к контактным линзам и
средствам по уходу за контактными линзами.
Установлено, что наличие искусственной слезы может влиять на бактерицидную активность некоторых дез
инфицирующих средств (см. (51)). При проведении программного испытания, искусственная слеза может быть до
бавлена в линзы, чтобы имитировать налеты, которые могут появляться в реальных ситуациях. Включение
органической нагрузки предусматривает оценивание этапа чистки для удаления инородных веществ или связан
ных с ними микроорганизмов, а также взаимодействие остаточного органического вещества с пропитывающим рас
твором.
Было сделано множество попыток разработать и стандартизировать модель искусственной слезы с целью
оценивания средств по уходу за контактными линзами. Цель попыток состояла в имитации естественной слезной
жидкости, однако ни одна модель не продемонстрировала полностью очень сложные свойства человеческих слез
или не создавала естественную слезную пленку на контактной линзе.
Слезная пленка состоит из поверхностного липидного слоя, водного слоя и муцинового слоя. Водный слой
содержит не менее 60 белковых компонентов, включая лизоэимы. лактоферрин. лилакалин. трансферрин. альбу
мин. каерулоплззмин, комплемент, гликопротеиды, антипротеиназы и различные иммуноглобулины, особенно сек
реторный IgA (см. (32)—(35)). Хотя существует много лабораторных моделей искусственных слез (см. (36)—(40)). ни
одна из них не содержит все компоненты естественных слез (см. (13J). Более того, концентрации слезных компонен
тов: активность и источники (например, яично-белый цвет по сравнению с лизозимом человека) в искусственных
моделях не полностью совпадают со слезами человека (см. (32). (33). (42) и (43)).
В дополнение к составу слезных компонентов необходимо учитывать некоторые дополнительные факторы
при попытке имитации естественной слезной пленки. Состав слез человека меняется со временем и у каждого че
ловека разный (см. (13)). Наиболее важно то. что. как только слезы поглощаются линзой, активность слезной
пленки может отличаться от первоначальной активности.
Можно обнаружить и другие несоответствия при попадании искусственных слез на поверхность линзы:
а) характер и состав макромолекулярной пленки на линзе будут зависеть от химической природы полимер
ной матрицы линзы (см. (46)—(50)) и
О) налеты на линзе будут зависеть от применяемой методики нанесения налета (см. (41) и (45)). Искусствен
ные слезы на линзе могут не точно представлять человеческие слезы, особенно когда граница раздела глаз — воз
дух и механическое мигание не продублировано т vitro (в лабораторных условиях).
Вследствие того, что добавление искусственной слезы не было стандартизировано для применения в дан
ном методе по настоящий момент времени, искусственная слеза не требуется для оценивания средств дезинфек
ции контактных линз. Известно, что некоторые правительственные органы здравоохранения (например.
Управление по контролю продуктов и лекарств. США) рекомендуют использовать искусственную слезу для
регис трации средства. Следовательно, настоящий стандарт касается программного испытания, проводимого
либо с ис кусственной слезой, либо без нее. Ниже приведен пример приготовления и использования
искусственной слезы (см. (52)).
Искусственную слезу готовят следующим образом: культивируют S. cerevislae на SDA при температуре от
20 ‘ С до 25 "С в течение 48 ч. Результат приготовления инокулята должен быть идентичен результату по 6.2.
Взвесь уничтожают при нагревании до (100 ± 2) °С в течение 10 мин и центрифугировании при скорости не более
5000 об/мин в течение не более 30 мин. Снова получают взвесь в бычьей сыворотке, которая лрощла обработку
температурой при 56 аС в течение 30 мин для полноты инактивации. Концентрация S. cerevislae в сыворотке дол
жна составлять от 1 * 10’ до 1 ч 104 КОЕ/мл.
После получения вводимого микроорганизма центрифугируют взвесь тест-микроорганизм. Снова получают
взвесь в искусственной слезе с концентрацией от 1 х 10’ д»1 * 10“ КОЕ/мл. Это и есть культуральный материал, ко
торый нужно использовать в 6.4.
16