ГОСТ РИСО 14729—2010
В программной процедуре по дезинфекции контактных линз искусственная слеза (органический
грунт) может входить в состав вносимого инокулята (см. приложение Е).
Культивируют инокулят на скошенном агаре при условиях, указанных в таблице 3.
Т а б л и ц а 3 — Среды и инкубационные условия для выращивания вводимого инокулята
Инокулят
СредаТемпература. ’C
Инкубационный период, ч
Р. aeruginosa
TSAO r 30 ДО 35
От 18 ДО 24
S. aureus
TSAОт 30 до 35
От 18
Д О
24
S. marcescens
TSAОт 30 до 35
От 18 до 24
C. albicanx или
C. albicans
SDA От 20 до 25
SDA От 30 до 35
От 42 до 48
От 18 до 24
F. solani
PDAОт 20 до 25
От 10 до 14
Используют стерильный DPBST или подходящий растворительдля смыва каждой культуры с ага
ра; смыв культуры с агара промывают, переносят в подходящий сосуд и встряхивают. Отфильтровыва
ютвзвеси F. solani черезстерильную стеклянную ватуили марлю, чтобы удалитьнитяные фрагменты.
Культивированные микроорганизмы после сбора допускается промывать с использованием цен
трифуги. Для осуществления диспергирования отдельных клеток допускается бактерийные взвеси от
фильтровывать (например, используя размер пор фильтра от 3 до 5 мкм). Все вводимые тест-культуры
доводят до концентрации от 1х 107до 1х 10еКОЕ/мл с помощью DPBST или другого подходящего рас
творителя. Определяют приблизительную концентрацию клеток каждой взвеси измерением помутне
ния взвеси или раствора взвеси с помощью спектрометра. Действительную концентрацию КОЕ/мл
определяют во время испытания для каждой взвеси, например чашечным методом подсчета.
Если используют центрифугу, каждый процесс центрифугирования следует проводить при темпе
ратуре от 20 °С до 25 X не более 10 мин и не более 4000 об/мин. Более длительные периоды центри
фугирования могут потребовать более низких скоростей.
Взвеси бактериальных и дрожжевых клеток используют в день приготовления. Споровые взвеси
можно использовать в течение 7 дней после приготовления при условии хранения их при температуре от
2 °С до 8 °С.
6.3 Автономная процедура
6.3.1 Методика испытаний введением тест-культур
6.3.1.1 Готовятодну или более пробирок(для каждой испытуемой партии), содержащую как мини
мум 10 мл раствора испытуемого средства на каждую вводимую тест-культуру.
П р и м е ч а н и е — Для обеспечения эффективного техничного исполнения испытания следует использо
вать пробирки для образцов, контейнеры. Поскольку между ингредиентами раствора и материалом пробирок мо
жет быть несовместимость, необходимо использовать пробирки, изготовленные из соответствующего материала.
Вводят в пробирку с испытуемым образцом средства взвесь испытуемых тест-культур в количес
тве от 1.0 х 105до 1.0 х 10бКОЕ/мл. Следует убедиться, что объем вносимой бактериальной культуры
не превышает 1% объема образца. Следует обеспечить полноедиспергирование инокулята путем над
лежащего перемешивания.
6.3.1.2 Хранить инокулированное средство следует при температуре от 20 X до 25 X . Темпера
туру необходимо регулировать с помощью калиброванногоустройства и регистрировать показаниятем
пературы.
Если средство чувствительно к свету, его следует защищать в течение периода проведения испы
тания от попадания света.
6.3.1.3 Берут 1.0 мл аликвотных проб инокулированного средства для определения числа жизне
способных микроорганизмов в течение периода времени, составляющего 25 %. 50 %, 75 % и 100 % мини
мального рекомендованного времени дезинфекции всех микроорганизмов, и в дополнение — не менее
400 % минимального рекомендованного времени дезинфекции дрожжей и плесени. Если рекомендуется
дезинфицировать контактные линзы в течение ночи, время пропитывания составляет 8 ч.
6