ГОСТ 6805-97
перемешивают.
или стекловата; 6 — кран, предпочтительно из
мовой земли и 3 см3H2S04
(
6,36 г)
массовой доли кофеина
емкостях. Для каждой щелочной колонки требуется 5,16 г
смеси). Полученный влажный порошок переносят частями,
примерно по 2 г, в хроматографическую колонку диаметром
21 мм (Б.5.1), нижняя часть которой заполнена набивкой из
хлопковой ватыили стекловаты. Без особого усилия уплотняют
смесь после каждого добавления материала, применяя для
этого стеклянную палочку, до образования однородного и
плотного слоя.
Переносят в щелочную колонку слой смеси, подготов
ленной по Б.7.1.2. Для исключения потерь кофеина химичес
кий стакан дважды очищают порциями диатомовой земли по 1
г и также помещают в щелочную колонку. Поверх кладут слой
хлопковой ваты или стекловаты.
Б.7.2.1.2 Колонка 2 (кислотная) (рисунок Б.1)
Тщательно перемешивают 3 г диатомовой земли (Б.4.3)
с 3 см3 раствора серной кислоты (Б.4.1) до получения одно
родной смеси.
(Материал для заполнения колонки может быть подго
товлен заранее и храниться в закрытых емкостях. Для каждой
кислотной колонки требуется 6,36 г смеси).
Полученный влажный порошок переносят частями, при
мерно по 3г, в хроматографическую колонку диаметром 17мм
(Б.5.1), нижняя часть которой заполнена набивкой из стекло
ваты. Без особого усилия уплотняют смесь после каждого
добавления материала, применяя для этого стеклянную палоч
ку, до образования однородного и плотного слоя. Поверх
кладут слой стекловаты.
Б.7.2.1.3 Очистка и извлечение кофеина
Установить колонки одну над другой так, чтобы жид
кость из щелочной колонки прямо стекала в кислотную ко
лонку. Пропускают постепенно 150 см3 диэтилового эфира
(Б.4.5) через обе колонки.
Кран колонки 2 регулируют так, чтобы на поверхности
содержимого в колонке остался тонкий слой жидкости. После
этого колонку 1 убирают, а через колонку 2 пропускают еще
50 см3диэтилового эфира. Вытекающая из колонки 2жидкость
сливается в отходы. (Использованный диэтиловый эфир может
быть восстановлен путем взбалтывания его с сернокислым
железом).
Избыточное количество диэтилового эфира удаляют с
помощью вакуум-насоса или резиновой груши до техпор, пока
не прекратится стекание капель диэтилового эфира из колонки
и выходящий из крана воздухне будетнести лишь слабый запах
диэтилового эфира.
1
—
колонка 1 (щелочная), длина 250 мм; 2
—
Для извлечения кофеина через колонку 2 пропускают
хлопковая вата или стекловата; 3 —смесь диатомо
45—50 см3 хлороформа (Б.4.7), который собирают в мерную
вой земли и тестового образца; 4 — 3 г диатомовой
колбу вместимостью 50 см3с одной меткой (Б.5.4.3) и доводят
земли и 2 см3 NaOH
(
5,16 г); 5
—
хлопковая вата
объем до метки хлороформом. Полученную смесь тщательно
политетрафторэтилена; 7 — колонка 2 (кислот
Краны колонок регулируют так, чтобы скорость жидкос
ная), длина 250 мм; 8 —стекловата; 9 —3 г диато
ти (хлороформа идиэтилового эфира) не превышала 3см3/мин
и обеспечивала равномерное прохождение жидкости через все
Рисунок Б.1 —Колонки для определения
содержимое колонок.
Во избежание вдыхания паров растворов диэтилового
эфира и хлороформа и возможности взрыва, их добавление должно проводиться в хорошо вентилируемом
вытяжном шкафу.
Б.7.2.2 Спектрометрические измерения
Б.7.2.2.1 Спектрометрическое измерение анализируемого раствора
На спектрофотометре (Б.5.2) измеряют спектральную поглощающую способность (СПС) полученного
раствора в кварцевой кювете (Б.5.3) по отношению к чистому, насыщенному водой хлороформу при длине
волны максимального поглощения 276 нм и при длинах волн на 30 нм выше и ниже этого значения —для
подтверждения чистоты полученного кофеина.
1914