ГОСТ 6805-97
Б.2 Ссылки
ГОСТ 15113.0—77 Концентраты пищевые. Правила приемки, отбор и подготовка проб
ГОСТ 15113.4—77 Концентраты пищевые. Методы определения влаги
Б.З Сущность метода
Метод заключается в обработке кофе раствором аммиака с целью освобождения кофеина, очистке
кофеина чистым диэтилэфиром на двух колонках (первая —со щелочной средой, вторая - с кислой средой),
извлечении кофеина чистым хлороформом и определении его массовой доли спектрофотометрическим
методом.
Б.4 Реактивы
Все реактивы должны быть удостоверяемого аналитического качества. Применяемая вода должна быть
дистиллированной или, по крайней мере, иметь соответствующую чистоту.
Б.4.1 Серная кислота.Раствор массовой концентрации 200 г/дм3 [молярнойконцентрации
(H2S04) = 2 моль/дм3].
Б.4.2 Едкийнатр.Раствормассовойконцентрации80г/дм3[молярнойконцентрации
(NaOH) = 2 моль/дм3].
Б.4.3 Диатомовая земля. Использование этого материала обеспечивает восстановление не менее 98 %
кофеина, содержащегося в анализируемой пробе.
П р и м е ч а н и е —Подходящим материалом является Celite 545.
Б.4.4 Аммиак. Раствор 70 г/дм3 (1 часть концентрированного раствора аммиака, р2о ~ 0,9 г/см3 + 2
части воды).
Б.4.5 Диэтиловый эфир чистый или повторно очищенный (Б.7.3) хроматографически и насыщенный
водой.
Для повторной очистки пропустить 800 см3 диэтилового эфира через колонку, содержащую 100 г
основной окиси алюминия 1-го класса активности. Повторно очищенный таким образом диэтиловый эфир
до использования должен содержаться в темных бутылях.
П р и м е ч а н и е —Вместо хроматографически повторно очищенного материала может применяться
недавно дистиллированный и свободный от пероксидов диэтиловый эфир.
Б.4.6 Кофеин [1,3,7-триметил-2,6-диоксопурин (C8H
i
0O2N4 •Н20)] чистый, безводный.
Б.4.7 Хлороформ чистый или повторно очищенный (Б.7.3) хроматографически, как это описано в Б.4.5,
и насыщенный водой.
Б.5 Аппаратура
Б.5.1 Хроматографические колонки (см. рисунок Б.1) длиной 250 мм, внутренним диаметром 21 мм
(колонка 1) и 17 мм (колонка 2), с кранами предпочтительно из политетрафторэтилена (ПТФЭ).
Б.5.2 Спектрофотометр с точностью до 0,004 единиц поглощения в рамках используемого диапазона.
Б.5.3 Кюветы кварцевые толщиной поглощающего свет слоя 1см.
Б.5.4 Обычное лабораторное оборудование, включая:
Б.5.4.1 Химические стаканы вместимостью 100 см3.
Б.5.4.2 Баню водяную.
Б.5.4.3 Мерные колбы с одной меткой вместимостью 50, 100 и 1000 см3.
Б.5.4.4 Пипетки вместимостью 2 и 5 см3с одной меткой.
Б.5.4.5 Весы аналитические с погрешностью взвешивания ± 0,001 г.
Б.6 Отбор проб
Отбор проб —по ГОСТ 15113.0.
Б.7 Проведение анализа
Б.7.1 П о д г о т о в к аа н а л и з и р у е м о г оо б р а з ц а
Б.7.1.1 Рассчитывают массовую долю сухого вещества в анализируемом образце после определения
содержания влаги по ГОСТ 15113.4.
Б.7.1.2 1,0 г натурального жареного кофе, взвешенного с погрешностью ± 0,001 г, помещают в химичес
кий стакан вместимостью 100 см3(Б.5.4.1), добавляют 5 см3раствора аммиака (Б.4.4) и помещают в кипящую
водяную баню (Б.5.4.2) на 2 мин. После охлаждения количественно переносят в мерную колбу вместимостью
100 см3 (Б.5.4.3) и дистиллированной водой доводят объем до метки, тщательно перемешивают и оставляют до
полного осаждения. С помощью пипетки (Б.5.4.4) отбирают 5 см3 полученного раствора, помещают в
химический стакан вместимостью 100 см3 (Б.5.4.1), добавляют 6 г диатомовой земли (БАЗ) и тщательно
перемешивают.
Б.7.2 О п р е д е л е н и ем а с с о в о йд о л ик о ф е и н а
Б.7.2.1 Заполнение колонок
Б.7.2.1.1 Колонка 1 (щелочная) (рисунок Б.1).
Тщательно перемешивают 3гдиатомовой земли (Б.4.3) с 2 см3раствора едкого натра (Б.4.2) до получения
однородной смеси. (Материал для заполнения колонки может бытьподготовлен заранее и храниться в закрытых
1318