ГОСТ 30364.2-96
необходимости еше раз расплавляют готовую среду, разливают в стерильные чашки Петри и
подсушивают. Среда пурпурно-красного цвета. Среду готовят с соблюдением стерильности.
3.2.4.12 Среда Ресселя
К I дм32.0 %-ного питательного или мясо-пептонного агара (pH 7,2) прибавляют 10 глактозы,
1 г глюкозы и 10 см’ индикатора Лндреде. Среду разливают в пробирки в количестве 5—6 см3,
стерилизуют в автоклаве при (112±1) *С в течение 20 мин и скашивают так, чтобы на 2—3 см
от дна пробирки агар оставался в Blue столбика. Готовая среда бледно-розового цвета.
3.2.4.13 Среда Кауфмана
Колбу, содержащую 4,5 г мела, стерилизуют сухим жаром, наливают в нее 90 см3 мясо-пеп
тонного бульона и стерилизуют при (121±1) "С 30 мин. Перед посевом в асептических условиях в
колбу добавляют 2 см3 раствора .Люголя, 10 см3 50 %-ного раствора серноватистокислого натрия
(тиосульфата), 5 см3 стерильной желчи и 1 см3 водного раствора бриллиантового зеленого в
соотношении 1:1000. Смесь тщательно взбалтывают.
3.2.4.14 Раствор бриллиантового зеленого
1 г бриллиантового зеленого растворяют 100 см3спирта ректификата с массовой долей 96 % и
настаивают в течение 24 ч. К 10 см3полученного 1%-ного спиртового раствора доливают до 100см3
дистиллированной воды, тщательно взбалтывают. Полученный водный раствор бриллиантовой
зелени в соотношении 1:1000.
3.2.4.15 Желчь
Отобранную асептически желчь крупного рогатого скота прогревают на кипящей водяной бане
в течение 1 ч. После отстаивания фильтруют и рахтивают по колбам, стерилизуют текучим паром
три дня подряд по 20 мин или однократно в автоклаве при температуре (112±1)*С. Можно
использовать сухую желчь, при этом 1г сухой желчи соответствует 10 м3 натуральной желчи.
3.2.4.16 Раствор Люголя для приготовления среды Кауфмана
25 г йодида калия растворяют в 5—10 см3дистиллированной воды, прибавляют 20 г кристал
лического йода, оставляют на несколько часов до полного его растворения, затем приливают
остальное количество —до 100 см3дистиллированной воды.
3.2.4.17 Раствор серноватистокислого натрия (тиосульфата, гипосульфита)
50 гхимически чистого кристаллического серноватистокнслого натрия (тиосульфата, гипосуль
фита) доливают до 100 см3дистиллированной водой, стерилизуют кипячением в течение 30 мин.
3.2.4.18 Селенитовая среда Лейфсона
Для приготовления среды готовят два раствора: А и Б.
Раствор А состоит из 5 г пептона, 7 г безводного двузамешеиного фосфорнокислого натрия
(гидрофосфата), 3 г однозамешенного фосфорнокислого натрия (дигидрофосфата), 4 г химически
чистой лактозы, I дм3дистиллированной воды. pH (7.0±0.1). Компоненты смешивают, разливают в
стерильную посуду по 225 см3и стерилизуют текучим паром по 30 мин или при (112±1) *С в течение
30 мин.
В раствор Б входит 10 %-ный раствор кислого селенистокнслого натрия, приготовленного на
стерильной дистиллированной воде (готовят перед употреблением).
Перед началом работы к 225 см3 раствора А стерильно добавляют 9 см3 раствора Б.
3.2.4.19 Магниевая (хлористо-магниевая) среда
Среда состоит из трех растворов.
Раствор I: пептон —4.2 г. натрия хлорид —7,15 г, калия дигилрофосфат — 1,48 г. дрожжевой
диализат —9 см3(производство ИЭИМ АМН им. Н.Ф. Гамалея), вода дистиллированная —890 см3.
Раствор II: магния хлорид —35,7 г, вода дистиллированная —90 см3.
Раствор III: бриллиантовый зеленый 0,5 %-ный. водный раствор —0.9 см3.
Все три приготовленных раствора смешивают, pan ива ют в колбы, флаконы, пробирки.
Стерилизуют при (112±1) ’С 30 мин.
При отсутствии дрожжевого диализата (производство ИЭИМ АМН им. Н.Ф. Гамалея) допус
кается замена его дрожжевым экстрактом.
3.2.4.20 Среда Крумвиде-Олькешшкого (трехсахарный агар с мочевиной)
Агар питательный сухой —25 г. лактоза — 10 г, сахароза — 10 г. глюкоза —1 г. аммоний-же
лезо (III) сульфат (соль Мора) (FeS04(NH4)20 6Н,0) —0,2 г, натрия тиосульфат (гипосульфит,
серноватистокислый натрий) —0,3 г, мочевина — 10 г, феноловый красный 0,4 %-ный водный
раствор —
4
см3, вода дистиллированная — 1дм3.
Соли предварительно растворяют в небольшом объеме дистиллированной воды. Углеводы и
мочевину также растворяют в небольших объемах воды при подогревании на водяной бане. Сухой
8
46