8
Другую пару чашек используют для более разведенного высеваемого продукта — исходной суспензии и/или десятикратных разведений продукта.
Чашки с внесенным в них продуктом и/или его разведением заливают селективно-диагностической агаризованной питательной средой.
Посевы в чашках инкубируют при температуре (37 + 1) °С в течение (24 + 2) ч.
- После инкубирования посевов отбирают чашки, на которых выросло от 15 до 150 типичных колоний. Подсчитывают на отобранных чашках количество выросших типичных колоний.
При посеве методом мембранных фильтров на них подсчитывают колонии в том случае, если их менее 15.
Примечание — Дополнение введено в связи с тем, что поверхность мембранного фильтра намного меньше, чем чашки Петри.
Выбирают по три типичных колонии каждого типа для пересева на поверхность питательного агара для дальнейшего подтверждения принадлежности выросших культур к бактериям семейства Enterobacteriaceae.
- Метод посева на агаризованную селективно-диагностическую среду
- На подсушенную поверхность агаризованной селективно-диагностической среды двух чашек Петри наносят по 0,1—0,2 см3 продукта, если продуктжидкий, или исходной суспензии вслучае не жидкого продукта.
Другую пару чашек используют для других количеств высеваемого продукта — исходной суспензии и/или десятикратных разведений продукта.
Внесенный в чашки продукт или его разведения распределяют по поверхности селективно-диагностической агаризованной питательной среды стерильным шпателем.
Посевы в чашках инкубируют при температуре (37 + 1) °С в течение (24 + 2) ч.
- Подсчет и отбор типичных колоний для дальнейшего подтверждения их принадлежности к бактериям семейства Enterobacteriaceae проводят по 5.1.2.
Примечание — 5.2 введен дополнительно в связи с включением в настоящий стандарт метода посева на поверхность питательных сред.
- Количество продукта и/или его разведений для посева в или на агаризованную селективно-диагностическую среду зависит от предполагаемого уровня обсемененности продукта бактериями семейства Enterobacteriaceae или от нормативных значений.
- Количество бактерий семейства Enterobacteriaceae на 1 см3 или на 1 г анализируемого продукта пересчитывают по ГОСТ 26670, исходя из числа подтвержденных типичных колоний, выросших на чашках Петри при посеве в или на агаризованные селективно-диагностические среды.
- Питательные среды и растворы реактивов
Химические вещества, используемые для приготовления питательных сред и реактивов, должны быть аналитического качества, а вода дистиллированной.
- Селективная среда обогащения: глюкозный бульон с желчью и бриллиантовым
зеленым
- Состав
ферментативный гидролизат животных тканей, г 10,0
глюкоза, г 5,0
натрий фосфорнокислый двузамещенный безводный (Na2 HPO4), г 6,45
калий фосфорнокислый однозамещенный безводный (КН2 Р04), г 2,0
говяжья желчь для бактериологического использования, г 20,0
бриллиантовый зеленый, г 0,0125
(или 2,5 см3 раствора, приготовленного по 6.1.3, в случае приготовления среды из отдельных компонентов);
вода, см3 1000
Приготовление