7
- Схема выявления бактерий семейства Enterobacteriaceae приведена в справочном приложении ДА.
- Определение количества бактерий семейства Enterobacteriaceae (метод НЧВ)
- Предварительное обогащение в неселективной среде
Для посева используют не менее трех последовательных проб для анализа, отличающихся между собой в 10 раз по массе или объему. Каждой пробой для анализа засевают три повторности. Выбираемая последовательность разведений для посева зависит от предполагаемого уровня обсемененности продукта бактериями семейства Enterobacteriaceae или от нормативных значений.
Предварительное неселективное обогащение проводят путем посева продукта и/или его разведений в забуференную пептонную воду.
Посевы инкубируют при температуре (37 + 1) °С в течение (18 + 2)ч.
- Обогащение в селективной жидкой среде
Пробирки с селективной средой инокулируют 1 см3 из каждого посева, полученного по 4.2.1, и инкубируют при температуре (37 + 1) °С в течение (24 + 2) ч.
- Выделение типичных колоний, подтверждение принадлежности выделенных типичных колоний к бактериям семейства Enterobacteriaceae
Выделение типичных колоний, подтверждение принадлежности выделенных типичных колоний к бактериям семейства Enterobacteriaceae проводят по 4.1.3 и 4.1.4.
- Схема определения количества бактерий семейства Enterobacteriaceae по методу НВЧ с предварительным обогащением приведена в справочном приложении ДА.
- Наиболее вероятное число бактерий семейства Enterobacteriaceae в 1 см3 или 1 г пробы продукта (НВЧ) рассчитывают исходя из числа посевов, в которых подтверждено присутствие этих бактерий. Определение наиболее вероятного числа — в соответствии с таблицей приложения ДБ.
- При выявлении бактерий семейства Enterobacteriaceae и определения их количества по методу НВЧ в свежих продуктах, не содержащих сублетально поврежденных микроорганизмов, подвергнутых каким-либо воздействиям, например сушке, заморозке и т. д., допускается высевать пробу продукта для анализа и/или его разведения непосредственно в селективные среды, минуя этап неселективного обогащения.
Количество высеваемого продукта или его разведения и среды должно быть в соотношении не менее чем 1:10.
Для увеличения массы или объема высеваемой пробы продукта допускается использование селективных жидких сред двойной концентрации.
При непосредственном посеве продукта в селективную среду посевы инкубируют при температуре (37 + 1) °С в течение 48 ч.
Примечен ие — 4.3 введен в связи с тем, что непосредственный посев в селективные питательные среды для пищевых продуктов, в которых микроорганизмы не подвергнуты каким-либо сублетальным воздействиям, предусмотрен для упрощения испытания и сокращения его продолжительности.
- Методы определения количества бактерий семейства Enterobacteriaceae (подсчет колоний)
Методы определения количества бактерий семейства Enterobacteriaceae посевом в или на ага- ризованные селективно-диагностические среды основаны на посеве определенного количества продукта и/или его разведений в или на агаризованную селективно-диагностическую среду, инкубировании посевов, подсчете типичных колоний, подтверждении по биохимическим и культуральным признакам принадлежности выделенных типичных колоний к бактериям семейства Enterobacteriaceae.
- Метод посева в агаризованную селективно-диагностическую среду
Для определения количества бактерий семейства Enterobacteriaceae по 1 см3 продукта, если продукт жидкий, или по 1 см3 исходного разведения в случае не жидкого продукта вносят в каждую из двух стерильных чашек Петри.