10
- Приготовление
Кристаллический фиолетовый переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в воде. Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 см3 и доводят водой до метки.
Примечание — Пункты 6.2.3—6.2.4 введены дополнительно в соответствии с 6.1.2.
- Приготовления чашек Петри с агаром
Приблизительно по 15 см3 агаризованной среды, охлажденной до температуры 44 °С—47 °C, разливают в стерильные чашки Петри и дают затвердеть.
Непосредственно перед использованием подсушивают поверхность среды в чашках Петри, предпочтительно при снятых крышках и поверхностью агара, смотрящей вниз, в сушильном шкафу до тех пор (около 30 мин), пока на поверхности агара не останется влаги.
Если среда приготовлена заранее, то не подсушенную среду в чашках Петри можно хранить в условиях, которые не приведут к изменению химического состава среды, до двух недель при температуре
(5 + 3) °С.
- Питательный агар
- Состав
мясной экстракт, г 3,0
ферментативного гидролизат животных тканей, г 5,0
натрий хлористый, г 5,0
агар, г 9—18
(зависит от желирующей способности агара)
вода, см3 1000
- Приготовление
Растворяют компоненты или дегидратированную основу среды в воде. Нагревают среду на слабом огне до кипения, кипятят 1—2 мин, доводят объем до 1 дм3, охлаждают до температуры 45 °С—55 °С. Устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял (7,3 + 0,2) при температуре 25 °С. Разливают среду по колбам или пробиркам и стерилизуют в автоклаве при температуре (121 + 1) °С в течение 15мин.
- Глюкозный агар
- Состав
ферментативный гидролизат казеина, г 10,0
экстракт дрожжей, г 1,5
глюкоза, г 10,0
натрий хлористый, г 5,0
бромкрезоловый пурпуровый, г 0,015
(или 1,5 см3 раствора, приготовленного по 6.4.3, в случае приготовления среды из отдельных компонентов);
агар, г 9—18
(зависит от желирующей способности агара)
Вода,см3 1000
- Приготовление
Растворяют компоненты или дегидратированную основу среды в воде. Нагревают среду на слабом огне до кипения, кипятят 1—2 мин, доводят объем до 1 дм3, охлаждают до температуры 45 °С—55 °С. Устанавливают рН так, чтобы он составлял (7,0 + 0,2) при температуре 25 °С. Разливают среду по 5 см3 в пробирки и стерилизуют в автоклаве при температуре (112 + 1) °С в течение 20 мин.
Примечание — Изменение режима стерилизации среды введено в связи с тем, что среды Гисса с углеводами для предотвращения разложения углеводов стерилизуют при 112 °С.
Пробирки после стерилизации оставляют в вертикальном положении. Приготовленную среду можно хранить при температуре (5 + 3) °С не более 1 нед. Если среда хранилась при температуре (5 + 3) °С, то для удаления кислорода воздуха, непосредственно перед использованием, среду прогревают (регенерируют) в кипящей водяной бане или текучим паром в автоклаве в течение 15 мин, затем быстро охлаждают до температуры инкубации посевов.
- Раствор бромкрезолового пурпурового
- Состав:
бромкрезоловый пурпуровый, г 1
раствор гидроокиси натрия молярной концентрацией
с (NaOH) =0,1 моль/дм3, см3 19
вода, см3 80