20
Описание метода НВЧ и разъяснение по его применению
- Из пробы продукта для анализа готовят исходное и ряд десятикратных разведений до такой степени, чтобы можно было определить предполагаемое НВЧ бактерий семейства Enterobacteriaceae.
Высеваемые объемы продукта и его разведения выбирают следующим образом:
а) по 1 см3 из разведения 10-1 и последующих более высоких разведений, если необходимо определить количество бактерий семейства Enterobacteriaceae, превышающее 3 клетки в 1 г (см3) продукта;
б) по 10 см3 из разведения 10-1 или 1 см3 неразведенного продукта и по 1 см3 из разведения 10-1 и последующего более высокого разведения, если необходимо определить количество бактерий семейства Enterobacteriaceae, превышающее 3 клетки в 10 г (см3) продукта;
в) по 10 и 1 см3 неразведенного продукта и ряда его разведений, если необходимо определить количество бактерий семейства Enterobacteriaceae, превышающее 3 клетки в 100 г (см3) продукта.
- Разведения и неразведенный продукт высевают параллельно в три колбы (пробирки) с питательной средой. Инокулум объемом 1 см3 высевают в 10 см3 среды нормальной концентрации, инокулумы объемом 10 см3 высевают в 10 см3 среды двойной концентрации.
- Посевы инкубируют в условиях, указанных в настоящем стандарте.
- НВЧ бактерий семейства Enterobacteriaceae определяют, исходя из количества положительных пробирок с посевами по таблице.
- Для определения НВЧ выбирают три самых высоких последовательных разведений, в первом из которых все три повторности положительные, а в последнем и в последующем уже не оцениваемом разведении все три повторности отрицательные (например: 3, 2, 0 или 3, 2,1,0).
- Если после разведения, в котором все три пробирки были отрицательными, одна из пробирок большего (то есть следующего за ним) разведения окажется положительной (например: 3, 2, 0, 1), то для определения НВЧ учитывают три разведения, начиная с того, в котором количество положительных пробирок было меньше трех (то есть 2, 0,1).
- Если после наибольшего разведения стремя положительными пробирками было посеяно лишь одно разведение, в котором оказались положительными одна или две пробирки, то НВЧ бактерий семейства Enterobacteriaceae записывают как «более чем», так как в последующих разведениях могли бы быть положительные пробирки. Например, при посеве число положительных пробироксоответствовало 3,3,1 или 3,3,2, то согласно таблице НВЧ будет более 460 или более 1100.
- Если ни в одном из разведений не было трех положительных пробирок, то для определения НВЧ учитывают три последовательных разведения (например, 2,2,1,0 или 2,1,0, 0).
- Если все пробирки посеянных разведений будут отрицательными (то есть 0, 0, 0), то НВЧ бактерий семейства Enterobacteriaceae ниже числа, выявляемого посеянными разведениями (например, «ниже чем 3 в 10 г») и наоборот, если все пробирки посеянных разведений будут положительными (то есть 3,3,3), то НВЧ будет выше его максимального значения, определяемого посеянными разведениями (например, «выше чем 1100 в 1 г»).
При необходимости определения конечного числа бактерий исследование повторяют.
- Если три десятикратных разведения были более низкими или более высокими по сравнению с приведенными в таблице, то НВЧ бактерий семейства Enterobacteriaceae в продукте будет на столько разрядов ниже или выше, на сколько разрядов посеянные разведения отличаются от табличных.
Например, для комбинации чисел 3, 2,1 НВЧ составляет 150 микроорганизмов в 1 г продукта, в случае, если