ГОСТ I»51650—2000
Содержимое колбы перемешивают встряхиванием. Колбу соединяют с обратным холодильником и
нагревают на водяной бане при кипении реакционной смеси в течение 3 ч. Затем в колбу через
холодильник добавляют 150 см3 воды; колбу снимают с бани и охлаждают до комнатной температуры.
После охлаждения жидкую фазу реакционной смеси декантацией переносят в делительную
воронку, оставляя остаток продукта в колбе. В колбу с остатком добавляют 150 см3 н.гексана.
содержимое колбы энергично перемешивают и и.гексан декантируют в делительную воронку.
Воронку закрывают пробкой и энергично встряхивают, затем закрепляют в штативе и оставляют
для расслаивания жидкостей. Для разделения образовавшейся эмульсии к смеси вделительной воронке
добавляют 20 см3 этилового спирта. После расслаивания нижнюю водно-спиртовую фазу сливают
обратно в колбу с осадком, а гексановый экстракт переливают в колбу вместимостью 500 схт3.
Такуюобработку реакционной смеси проводят еще два раза, используя для экстракции и.гексан
по 100 см3 и этиловый спирт для расслаивания эмульсии, порциями по 20 см3.
По окончании экстракции остаток в колбе и гидролизат отбрасывают, а экстракт промывают
в делительной воронке дистиллированной водой три раза по 50 см3 и упаривают порциями в
предварительно взвешенной с точностью до второго знака после запятой круглодонной колбе
вместимостью 250 см3 на ротационном испарителе при температуре водяной бани не более 60 “С.
Колбу с экстрактом остаатяют в вытяжном шкафу для удаления следов растворителя, после чего
вновь взвешивают. По разности между взвешиваниями определяют массу выделенного экстракта.
От экстракта в колбе отбирают ’/5 часть в бюксу, не взвешивая. Колбу с остатком экстракта
взвешивают. В бюксу с частью экстракта добавляют 0,1—0,2 см3раствора «свидетеля* бенз(а)пирена,
приготовленного по 4.2.3. Содержимое бюксы и остаток в колбе растворяют в небольшом объеме
петролейного эфира.
Для хроматографического разделения экстракта на стеклянную пластину размером 20x40 см
равномерно насыпают окись алюминия. Затем с помощью стеклянной палочки, разделенной на три
части (14, 1 и 3 см) резиновыми колечками толщиной 1 мм и шириной 3 мм, тщательно разравни
вают окись алюминия.
Полученные растворы количественно наносят на подготовленную пластину стеклянными капил
лярами: на узкую часть —раствор из бюксы («свидетель»), на широкую —экстракт продукта из колбы.
Растворы наносят равномерно сплошной полосой, отступив от нижнего края пластины 7 —8 см.
Пластину помещают в ванну для хроматографирования под небольшим 20“—25* углом,
наливают петролейный эфир так. чтобы он недоходил долинии нанесения пробы. Ванну накрывают
стеклом и проводят хроматографию, доводя фронт растворителя до верхнего края пластины.
Не высушивая пластину, облучают ее ультрафиолетовым светом и по светящейся полосе
«свидетеля* определяют место нахождения бенз(а)пирена в исследуемой пробе. Отмечают границы
полосы бенз(а)пирена на хроматограмме исследуемой пробы. Пластину высушивают на воздухе в
вытяжном шкафу.
Отмеченную на хроматограмме исследуемой пробы полоску окиси алюминия с помощью
предметного стекла снимают с пластины и количественно переносят на пористую пластину
фильтрующей воронки. Воронку соединяют с круглодонной колбой вместимостью 100 см3
и бенз(а)пирен элюируют с окиси алюминия 50 см3бензола, добавляя бензол небольшими порциями
и перемешивая окись алюминия на воронке палочкой. Бензол упаривают досуха на ротационном
испарителе при температуре водяной бани не более 60 С. Остаток в колбе октаном количественно
переносят в пробирку. Объем раствора в пробирке не должен превышать 5 см3.
При анализе некоторых продуктов не происходит полного и четкого разделения флуоресциру
ющих компонентов образца при первичном хроматографировании выделенного из продукта экстра
кта. В этом случае на пластине выделяют более широкую полоску окиси алюминия на уровне
«свидетеля*; бенз(а)пиреп элюируют с окиси алюминия бензолом так. как описано выше, и остаток
после упаривания растворяют в этиловом спирте и полученный спиртовой экстракт повторно
хроматографи руют.
Для хроматографивеского разделения спиртового экстракта используют пластину размером
15 х 30 см толщиной слоя окиси алюминия 0,3 мм. На пластине отделяют две полосы шириной 10
и 3 см. На широкую часть пластины наносят с помощью стеклянного капилляра спиртовой
экстракт анализируемого продукта, на узкую —раствор бенз(а)пнрена в петролейном эфире
(раствор «свиде тель»). Пластину помещают в ванну под углом 20 —25“ и проводят
хроматографию в хлороформе,
доводя фронт растворителя до верхнего края пластины. В ультрафиолетовом свете отмечают по
«свидетелю* полосу окиси алюминия с бенз(а)пнреном исследуемого продукта. Затем бенз(а)пирен
элюируют с окиси алюминия бензолом и проводят все дальнейшие операции так, как указано выше.
4