ГОСТ Р 51650-2000
Бенз(в)хризен, содержание основного вещества не менее 98 %.
Сефадекс LH-20.
Силикагель марки АСКГ по нормативному документу |7|.
Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и
оборудования с техническими характеристиками, а также реактивов и материалов по качеству не
ниже вышеуказанных.
5.2Подготовка к испытанию
5.2.1 Подготовка растворителей
Растворители (н.гексан, этиловый спирт, ацетон, бензол) перегоняют общепринятым способом
с дефлегматором.
Диметилформамид перегоняют, добавив в перегонную колбу 120 см5бензола и 36 см3 воды
на 1дм3 растворителя.
5.2.2 Приготовление ацетилпрованной целлюлозы
(50,0±2,0) г микрокристаллической целлюлозы помешают в плоскодонную колбу вместимостью
500 см3, добавляют приготовленную в отдельной колбе смесь 150 см3 бензола или толуола, 70 см3
уксусного ангидрида и 0,3 см3 серной кислоты. Реакционную смесь перемешивают магнитной
мешалкой в течение 6 —8 ч, остаапяют без перемешивания еще на 18 ч. после чего декантируют
жидкую фазу, а остаток залипают 300 см3 этилового спирта, перемешивают, оставляют в спирте
на 24 ч, затем целлюлозу отфильтровывают на воронке Бюхнера, промывают 100 см3этилового
спирта и дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод (по индикаторной
бумаге).
Затем проверяют хроматографическую активность ацетилированной целлюлозы. Для этого за
3 —4 ч до проведения анализа готовят смесь этилового спирта, ацетона и воды, взятых в объемном
отношении 60:25:15. и выливают ее в выстланную полосками фильтровальной бумаги
хроматогра фическую камеру. Высота слоя растворителя должна составлять 1,5 —2 см. 1,5 г
ацетилированной целлюлозы суспензируют в 7 см3 этилового спирта и выливают суспензию
ровным слоем на стеклянную пластину 5 х 20 см, дают растворителю полностью испариться на
воздухе и наносят на пластинку микрошприцем или стеклянным капилляром в точку 5 мкл
раствора бенз(а)пирена массовой концентрации 1мкг/см3. Пластину помешают в
хроматографическую камеру и оставляют в камере до тех пор. пока уровень растпорителя поднимется
не менее, чем на 100 мм отлинии старта. По окончании хроматографии пластину вынимают,
высушивают на воздухе и под лампой ультра фиолетового облучателя отмечают флуоресцирующее
голубым цветом пятно бенз(а)пирена. Изме ряют расстояние от стартовой линии до фронта
растворителя и до середины пятна бенз(а)пирена: рассчитывают значение Rf, оценивающую
скорость перемещения бенз(а)пнрена по пластинке, по формуле:
» _ ^"Ы1(6)
Rf~ г -
где /.БП — расстояние от стартовой линии до середины пятна бенз(а)пирена. мм;
L — расстояние от стартовой линии до фронта растворителя, мм.
Значение /?/бенз(а)пирена должно составлять 0,1.
Для приготовления рабочей пластины 5 г ацетилированной целлюлозы суспензируют в 20 см3
этилового спирта и выливают ровным слезем на пластину 20x20 см.
5.2.3 Приготовление стандартных растворов бенз(а)пирена и бенз(в)хризена
В стаканчики для пзвешивания (бюксы) отвешивают по (10.0±0,2) мг бенз(а)пирена и
бенз(в)хризена. Навески количественно переносят в мерные колбы вместимостью 100 см3:
бенз(а)пирен-бензолом. бенз(в)хризен-ацетоннтрилом. затем объем раствора бенз(а)иирена доводят
до метки бензолом, объем раствора бенз(в).хризена-ацетонитрилом. Полученные растворы имеют
массовую концентрацию 100 мкг/см3. Растворы хранят в холодном темном месте не более грех
месяцев.
5.2.4 Приготовление рабочих растворов бенз(а)пирена и бенз(в).хризена
Рабочие растворы готовят разведением стандартных растворов, используя пипетки вместимостью
1, 5 и 10 см3и мерные колбы вместимостью 100см3, объем раствора доводят до метки соответствующим
растворителем, перемешивают и хранят в холодном темном месте не более одного месяца.
Приготовление раствора бенз(а)пирена массовой концентрации 1,0 мкг/см3 (для определения
методом спекгрофлуорнметрии): из стандартного раствора отбирают 1,0 см3 и переносят в мерную
колбу вместимостью 100 см3; объем раствора доводят до метки бензолом.
9